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215次elisa檢測試劑盒實驗方法和步驟
1.實驗方法
我們采用的是水平乙酸纖維薄膜電泳法即用普通濾紙做鹽橋,在低溫常壓下的電泳。
2.實驗步驟
(1)把電泳緩沖液加入電泳槽內到紅線位置,鹽橋濾紙對折后用訂書機將其同定在橋架上,然后加蓋置于4℃冰箱或相應冷室里預冷。
(2)從低溫(-20℃)冰箱中取出樣品,于室溫下自然解凍,并同時將乙酸纖維薄膜裁成適當大小投入緩沖液中浸泡濕透。
(3)從緩沖液中取出乙酸纖維薄膜夾于兩張普通濾紙間,用手輕壓濾紙,以吸去薄膜上的多余緩沖液。
(4)樣品解凍后,用彎頭滴管吸取少量樣品液于點樣板上的小方格內,并依序記下樣品號碼,再用點樣刷蘸取適量樣品液點在乙酸纖維薄膜粗糙面距邊緣1.5cm處,之后迅速轉入電泳槽內,按規定方向(緩沖液pH值大于5.6的,樣品的電泳方向是由負極向正極泳動,若pH值小于或等于5.6則由正極向負極泳動)把點上樣的薄膜水平搭在鹽橋上,待調整好位置后加蓋飽和1~2min,接通電泳,選擇適當電壓和電流并按規定時間電泳。
(5)時間到后立即將電壓電流選擇調零和關掉電源,依次取出走完的乙酸纖維薄膜,放入相應的染色液中,染色5min后取出于5%乙酸溶液脫色1~2h,或直到電泳帶背影*清楚為止,自然風干后,照相或透明等處理,易于長期保存。
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