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大鼠熱休克蛋白70elisa檢測試劑盒實驗試劑準(zhǔn)和操作步驟

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大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)elisa檢測試劑盒試劑準(zhǔn)備:
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶:試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品,每管已標(biāo)定濃度,并且凍干。實驗前在每個標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL樣本稀釋液,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動助其溶解,使其恢復(fù)為每個標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。
2. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)elisa檢測試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃;                      2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL; 3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;                                                    4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。                                         5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。                                                                                     6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。                                                     7. 所有孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

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