人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒洗滌方式及注意事項

 人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒國產進口現貨中的洗滌

洗滌是ELISA實驗中是多次數的操作，也是非常重要的步驟。不嚴格的洗滌容易出現洗不干凈或交叉污染現象，實驗重復效果差的現象。不管用多道加樣器、洗瓶、吸管，還是洗板機，嚴格按照說明書操作不要減少步驟洗滌的洗滌體積、洗滌時間和洗滌次數。注意標準化操作將減少實驗誤差和不同實驗之間的誤差。操作者常出現洗板不干凈現象，請比照操作：

a)洗液不要溢出孔外，以免污染相鄰的孔，特別是每次洗板的前兩遍，若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔，其造成的交叉污染的孔是洗不掉的，背景肯定會增高。

b)特別注意：設計實驗的時候要考慮實驗孔的位置，保證甩掉洗液時，空白孔、低濃度孔或陰性對照組在上面或一側或分開。同時注意甩掉洗液的動作翻轉(從正上方旋轉120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右搖擺、旋轉來甩液體!甩出后以直線方式補2-3次甩出液體。

c)用干凈的濾紙，不要用衛生紙，因為細小粉塵或者碎屑容易吸附到孔底，導致洗板不干凈，結果偏高或偏低，重復孔的數值也會相差很大。

d)每次拍板不要重復在一個地方拍，特別是洗去酶的步驟;拍板不宜過輕，否則拍不干凈，拍板很用力不會對蛋白有什么影響。但注意不要太重，以至把板條給拍斷。每次洗板后輕叩幾下，后一次一定要扣干凈。

e)不能減少洗液體積、洗板時間和次數。洗板時間太短，洗板效果不佳。延長洗板時間和增加洗板次數可以使背景更干凈。

檢測范圍和保存條件及有效期

1.試劑盒保存：2-8℃

2.有效期：6個月

計算

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒國產進口現貨操作注意事項：

1)試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。

3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

4)使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6)洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7)底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

8)實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

9)不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

10)加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

11)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

檢測范圍：1ng/L -30ng/L