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129次ELISA試劑盒和 血清使用方法及操作
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品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準備
1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
240μg/L (5號標準品) 150ul的原倍標準品加入150ul的標準品稀釋液
120μg/L (4號標準品) 150ul的5號標準品加入150ul的標準品稀釋液
60μg/L (3號標準品) 150ul的4號標準品加入150ul的標準品稀釋液
30μg/L (2號標準品) 150ul的3號標準品加入150ul的標準品稀釋液
15μg/L (1號標準品) 150ul的2號標準品加入150ul的標準品稀釋液
0μg/L (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
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