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伴放線放線桿菌PCR檢測試劑盒操作流程

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                        伴放線放線桿菌PCR檢測試劑盒操作流程

有人喜歡晴天,看那明媚的陽光灑在大地,可以貪婪的享受著太陽帶給的溫柔;有人喜歡雪天,看那片片雪花從空中飄然落下,紛飛的舞姿那樣迷人。但我偏愛陰雨天,它雖不如晴天那樣溫暖,也沒雪花飄落那樣婀娜,但卻有它*的美。接下來介紹                伴放線放線桿菌PCR檢測試劑盒操作流程

適用儀器:

ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。

【樣本采集、存放及運輸】

u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;

u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);

u 運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。

自備試劑:

核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

使用方法:

注:所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理(樣本處理區(qū))

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。

2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))

取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

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