細胞培養步驟:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨，超低比價，貨期短，價格優，售后齊全。

商品屬性：

名稱    小鼠皮膚肥大細胞 2.組織來源：皮膚組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠皮膚肥大細胞分離自皮膚組織；皮膚肥大細胞廣泛分布于皮膚微血管周圍，分泌多種細胞因子，參與免疫調節（T細胞、B細胞、APC細胞活化）。皮膚肥大細胞表達MHC分子、B7分子，具有APC功能。表達大量的IgE-Fc受體，釋放過敏介質。具有弱吞噬功能，和血液的嗜堿粒細胞同樣，具有強嗜堿性顆粒的組織細胞。存在于血液中的這類顆粒，含有肝素、組織胺、5-羥色胺，由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質，可在組織內引起速發型過敏反應（炎癥）。由于在肥大細胞上結合的IgE抗體和抗原的接觸，使細胞多陷于崩壞。肥大細胞呈圓形或卵圓形，細胞核小，呈圓形或橢圓形，染色淺，位于細胞中央。細胞常成堆或單個分布于血管附近。細胞呈圓形或卵圓形，細胞質中充滿大小一致、染成藍紫色的顆粒，均勻分布在核周圍。 5.方法簡介： ()實驗室分離的小鼠皮膚肥大細胞采用膠原酶-混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： ()實驗室分離的小鼠皮膚肥大細胞經MCG-35免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M089 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細胞形態圓形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25% 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

人瘦素(LEP)免疫試劑盒現貨供應

人酪氨酰DNA 二酯1(TDP1)免疫試劑盒*直銷

人花生四烯酸(AA)免疫試劑盒*直銷

人C1q/TNF相關蛋白3(Cartonectin/CTRP3/CORS-26)免疫試劑盒進口、分裝

牛肌酸激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒*直銷

雞CD8分子(CD8)免疫試劑盒*直銷

大鼠水通道蛋白0(AQP-0)免疫試劑盒進口、分裝

裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒現貨供應

0.85%無菌生理鹽水（9ml/支） 英文名稱：0.85% Sterile ?

小鼠皮膚肥大細胞Canine Adenovirus (CAV)犬腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ADM (ProAM-N20)  上髓質素抗體(N端20肽) 規格: 0.1ml

Phoma glomerata葡萄莖枯病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的小鼠抗兔IgM 規格: 0.1ml

Radix scutellariae黃芩PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周CT054/C20orf54  核黃素轉運蛋白2抗體 規格: 0.2ml

Plasmodium vivax瘧原蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CARKD  碳水化合物激結構域蛋白質抗體 規格: 0.2ml

Bluetongue Virus(BTV)藍舌病病毒1型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周2,4-D(24D1)  2，4-二氯苯氧乙酸(除草劑)單克隆抗體 0.1ml

Herba cynomorii鎖陽染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周SYT3  突觸結合蛋白3抗體 規格: 0.1ml

Gordil Virus戈爾迪勒病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周AKAP2  蛋白激A2抗體 規格: 0.2ml

Duck Hepatitis Virus 2(DHV-2)鴨肝炎病毒2型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗大鼠IgM 規格: 0.1ml

Fructus trichosanthis瓜蔞LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周CD329/SIGLEC8  CD329抗體 規格: 0.2ml

Dispharynx nasuta長鼻分咽線蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周KCNE1  鉀離子通道蛋白家族成員1抗體 規格: 0.2ml