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脂肪酸合成酶測試盒10管/9樣

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-13 16:32:27瀏覽次數:134次

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貨號 BJ-01S9555
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產品屬性:  

產品名稱

檢測方法

規格

貨號

脂肪酸合成酶測試盒10管/9樣

紫外分光光度法

10管/9樣

BJ-01S9555

商品介紹:

測定意義:

細胞內脂質的積累是脂質合成與分解失衡的結果。脂肪酸合成增多,而氧化分解降低,會導致細胞內脂質積累。FAS是脂肪酸合成關鍵酶,催化乙酰和丙二酰而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中,在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。

測定原理

NADPH為還原力,FAS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成長鏈脂肪酸;通過測定NADPH的減少量,即可推算出FAS活性。

實驗中所需儀器和用品

研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、可調式移液槍和雙蒸水。

QQ截圖20220307153443.png 

注意事項:

①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用

樣品制備:

1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。

2). 過濾混濁溶液。

3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。

4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。

5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。

6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。

7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。

8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。

9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。

10).含脂肪的樣品用熱水提取。

FAM150A 基因全長ORF克隆

ATP6V1F 基因全長ORF克隆

H2AFB3 基因全長ORF克隆

PATE1 基因全長ORF克隆

GHRH 基因全長ORF克隆

PF4V1 基因全長ORF克隆

HIST1H4G 基因全長ORF克隆

SPINK13 基因全長ORF克隆

CDC42SE2 基因全長ORF克隆

MUSTN1 基因全長ORF克隆

脂肪酸合成酶測試盒10管/9樣小鼠氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)免疫試劑盒進口、分裝

小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)免疫試劑盒現貨供應

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操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

 


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