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線粒體蘋果酸脫氫酶測試盒100管/96樣

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產品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-14 11:35:34瀏覽次數:155次

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貨號 BJ-01S9774
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產品名稱

線粒體蘋果酸脫氫酶測試盒100管/96樣

規格

100管/96樣

貨號

BJ-01S9774

商品介紹:

測定意義:

MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,線粒體中MDH是TCA循環的關鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬穿梭系統、活性氧代謝和抗病性等。根據不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,細菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細胞中,NAD-MDH分布于細胞質和線粒體中。

測定原理:

MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導致340nm處光吸收下降。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
QQ截圖20220307153709.png

優點如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩定性好:試劑盒28℃存放6個月有效。

5、再現性好:變異系數CV=1.7%。

6、回收試驗: X =103.3%

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。

需自備的儀器和用品:

液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器(水系,50個,0.22μm)、濾膜(水系1個,0.45μm)、鈣柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可調式移液器、樣品瓶(50個,2mL)、超純水。

通用規則:

1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。

4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

 

 

實驗通用規則:

1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。

4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。

7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。

8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。

10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。

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實驗通用規則:

1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。

4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。

7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。

8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。

10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。

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