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產地	國產	加工定制	否
適用領域	科研	貨號	BJ-X97086

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產品名稱	小鼠乳腺上皮細胞
規格	5×10?Cells/T25培養瓶
貨號	BJ-X97086

商品屬性：

名稱 小鼠乳腺上皮細胞

2.組織來源：乳腺組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

小鼠乳腺上皮細胞分離自乳腺組織；乳腺是復管泡狀皮膚腺，主要由腺上皮細胞組成，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期，導管末梢發育成腺泡；近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發生都與乳腺上皮細胞（MEC）有密切聯系，體外分離培養MECs即成為研究開展的關鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織，乳腺由導管和腺泡組成，腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發育是由體內激素和局部合成的生長因子共同調控，其中乳腺表達的生長因子對乳腺上皮細胞的增殖、分化、凋亡產生極大的影響。乳腺上皮細胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織，為貼壁生長型細胞，呈多角形、圓形以及短梭形；乳腺上皮細胞主要功能即生乳功能。

5.方法簡介：

()實驗室分離的小鼠乳腺上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的小鼠乳腺上皮細胞經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-M020

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2代

消化液0.25%

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞培養步驟:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

圖片13.jpg

細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

人膽酸(Cholic acid)免疫試劑盒*直銷

人G蛋白偶聯受體152(GPR152/PGR5)免疫試劑盒*直銷

牛胰島素(Insulin)免疫試劑盒進口、分裝

雞抗鏈球菌溶血素O(ASO)抗體(IgG)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒進口、分裝

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EC-MUG培養基（100g）英文名稱：產品規格：100g

T1N0肉湯英文名稱：TIN0 Broth 產品規格：250g

HBI腸桿菌科細菌生化鑒定條(GB) 英文名

小鼠乳腺上皮細胞Ranavirus蛙病毒LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周phospho-VAV1(Tyr160) 磷酸化鳥苷酸轉換因子VAV1抗體規格: 0.1ml

West Nile Virus(WNV)西尼羅病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周Annexin A9 膜粘連蛋白9抗體規格: 0.2ml

Radix et caulis acanthopanacis senticosi刺五加LAMP鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周FOG1 GATA結合蛋白1伴侶蛋白抗體規格: 0.2ml

Nosema spp.蜜蜂微孢子蟲通用LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周PCNA(1C11) 小鼠增細胞核抗原單克隆抗體規格: 0.1ml

Mycobacterium avian禽結核分枝桿探針法熒光定量PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗雞IgG 規格: 0.1ml

Infectious Laryngotracheitis Virus(ILTV)雞傳染性喉氣管炎病毒染料法熒光定量PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周VNN1 管非癥分子1抗體規格: 0.2mlCCL21/6Ckine 淋巴細胞趨化因子CCL21抗體規格: 0.1ml

Goose Astrovirus（GAstV）鵝星狀病毒染料法熒光定量PCR試劑盒定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周phospho-MCK10/CD167a/DDR1(Tyr513) 磷酸化神經上皮酪激抗體（激10）規格: 0.1mlGoat Anti-Bovine IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的羊抗牛IgG 規格: 0.1ml

Influenza Virus A甲型流感（）病毒H1亞型RT-LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周phospho-FADD(Ser194) 磷酸化Fas死亡結構域相關蛋白抗體規格: 0.1mlMouse Anti-human IgM/AP 堿性磷酸（AP）標記的小鼠抗人IgM 規格: 0.1ml

小鼠源性成分PCR檢測試劑盒種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周URG4 (C terminal) 上調基因4抗體（C端）規格: 0.2mlPhospho-Rb (Ser608) 磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體規格: 0.1ml

Semen alpiniae katsumadai草豆蔻染料法PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周Renin 素/管緊張素形成Ren1抗體規格: 0.1mlITPR3 5-三磷酸肌醇受體3抗體規格: 0.2ml

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。