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河流弧菌熒光定量PCR試劑盒探針法

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-07-22 11:43:24瀏覽次數:140次

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產地 國產 加工定制
適用領域 科研 貨號 BJ-P10209
河流弧菌熒光定量PCR試劑盒探針法公司正在出售的產品:FAST kinase Fas活化的絲/蘇激抗體 規格: 0.1mlUBE2A/UBE2B/RAD6 泛素結合E2蛋白A抗體 規格: 0.2mlphospho-LSP1 (Ser252) 磷酸化白細胞F肌動蛋白結合蛋白抗體 規格: 0.1mlHIF3 alpha 缺氧誘導因子3α/HIF-3α抗體 規格: 0.1mlCT DNA(cal

實驗過程:

一、試劑準備

1. DNA模板

2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!

產品名稱

英文名稱

規格

貨號

河流弧菌熒光定量PCR試劑盒探針法

Vibrio fluvialis

多種規格

BJ-P10209

2.jpg

特點:

1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。

3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。

6. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。

PCR檢測試劑盒 (2).jpg


 

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物110pM              2μl

引物210PM             2μl

Taq酶(2U/μl           1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O              50 μl

PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min

3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項

1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。

2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。

3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。

6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。

7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。

 

 

操作流程

1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。

3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。

4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。

5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。

6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。

7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

NCI-H838 (非小細胞肺癌細胞) 1×10?cells/T25培養瓶

NCTC 1469 (小鼠正常肝細胞)1×10?cells/T25培養瓶

NEC (食管癌細胞)1×10?cells/T25培養瓶

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞)1×10?cells/T25培養瓶

P3X63Ag8.653 (小鼠骨髓瘤細胞)1×10?cells/T25培養瓶

PA-1 (卵巢畸胎瘤細胞)1×10?cells/T25培養瓶

PC-12 (未分化) (大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化))1×10?cells/T25培養瓶

PC-3M-2B4 (前列腺癌低轉移細胞株)1×10?cells/T25培養瓶

PC-3M IE8 (前列腺癌高轉移細胞株)1×10?cells/T25培養瓶

PLC/PRF/5 (肝癌亞力山大細胞) 1×10?cells/T25培養瓶

河流弧菌熒光定量PCR試劑盒探針法白細胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒  IL-10 ELISA Kit

L選擇素(SELL)ELISA試劑盒  SELL (L-Selectin) ELISA Kit

左右決定因子1(LEFTY1)ELISA試劑盒  Left/Right Determination Factor 1(LEFTY1)ELISA Kit

組織型纖溶酶原激活因子(tPA)ELISA試劑盒  Plasminogen Activator, Tissue(tPA)ELISA Kit

組織蛋白酶Z(CTSZ)ELISA試劑盒  Cathepsin Z(CTSZ)ELISA Kit

組織蛋白酶W(CTSW)ELISA試劑盒  Cathepsin W(CTSW)ELISA Kit

組織蛋白酶V(CTSV)ELISA試劑盒  Cathepsin V(CTSV)ELISA Kit

組織蛋白酶O(CTSO)ELISA試劑盒  Cathepsin O(CTSO)ELISA Kit

組織蛋白酶L3(CTSL3)ELISA試劑盒  Cathepsin L3(CTSL3)ELISA Kit

組織蛋白酶L(CTSL)ELISA試劑盒  Cathepsin L(CTSL)ELISA Kit


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