產品名稱：沃爾巴克氏菌通用熒光定量PCR試劑盒探針法

英文名稱：Wolbachia spp.

貨號:BJ-P10222

產品運輸：低溫運輸

產品保存：-20℃保存

產品有效期：一年

運輸：低溫

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

服務流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

實驗外包:

基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:

實驗外包:

1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建

特點優勢：

1. 特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。

3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。

一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。

二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。

1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。

5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。

6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。

7. NC 管中不加任何陽性對照。

8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線。

4179 (長尾綠猴胚胎細胞)1×10?cells/T25培養瓶

NK-92MI (惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞) 1×10?cells/T25培養瓶

SRSV/3T3 (小鼠SRSV轉化的3T3細胞)1×10?cells/T25培養瓶

WEHI 231 (小鼠B淋巴細胞)1×10?cells/T25培養瓶

3T3-Swiss albino (小鼠胚胎成纖維細胞)1×10?cells/T25培養瓶

OKT 3 (小鼠雜交瘤細胞(抗CD3))1×10?cells/T25培養瓶

IMR-90 (胚肺成纖維細胞)1×10?cells/T25培養瓶

M-7 (胚胎成纖維細胞)1×10?cells/T25培養瓶

M-20 (胚胎成纖維細胞)1×10?cells/T25培養瓶

M-22 (胚胎成纖維細胞)1×10?cells/T25培養瓶

沃爾巴克氏菌通用熒光定量PCR試劑盒探針法脂肪酸轉移酶2(LIPT2)ELISA試劑盒  Lipoyltransferase 2(LIPT2)ELISA Kit

脂肪酸轉移酶1(LIPT1)ELISA試劑盒  Lipoyltransferase 1(LIPT1)ELISA Kit

脂肪酸去飽和酶3(FADS3)ELISA試劑盒  Fatty Acid Desaturase 3(FADS3)ELISA Kit

脂肪酸去飽和酶2(FADS2)ELISA試劑盒  Fatty Acid Desaturase 2(FADS2)ELISA Kit

脂肪酸去飽和酶1(FADS1)ELISA試劑盒  Fatty Acid Desaturase 1(FADS1)ELISA Kit

脂肪酸合酶(FASN)ELISA試劑盒  Fatty Acid Synthase(FASN)ELISA Kit

脂肪酶N(LIPN)ELISA試劑盒  Lipase N(LIPN)ELISA Kit

脂肪酶M(LIPM)ELISA試劑盒  Lipase M(LIPM)ELISA Kit

脂肪酶K(LIPK)ELISA試劑盒  Lipase K(LIPK)ELISA Kit

脂肪酶J(LIPJ)ELISA試劑盒  Lipase J(LIPJ)ELISA Kit