T7 Endonuclease I

商品屬性：

商品介紹：

T7 核酸內切酶 I 識別并切割不配對 DNA、十字型結構 DNA、Holliday 結構或交叉 DNA、異源雙鏈 DNA 或者以更慢的速度切割含切刻的雙鏈 DNA。該酶切割錯配堿基 5′ 端的第一、第二或第三個磷酸二酯。
本產品是通過克隆重組表達 T7 核酸內切酶 I 基因，獲得的高純度蛋白，該酶無其他內切酶或外切酶污染。

活性定義：在 50 μl 反應體系，37℃ 條件下，1 小時將90% 以上的 1 μg 超螺旋十字型結構的 pUC（AT）* 轉化成 90% 以上的線性結構所需要的酶量定義為一個活性單位。
應用：
基因突變、SNP、TALEN 或 CRISPR/Cas9 形成的突變體檢測識別錯配 DNA分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA檢測或切割異源二聚體 DNA 和切刻 DNA隨機切割線性 DNA 進行 shot-gun 克隆：
50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2 ，1 mMDTT（pH 7.9 @ 25℃）
酶儲存液：50 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.5。
儲存：置于-20°C 可保存 2 年，避免反復凍融。
注意事項
(1) T7 核酸內切酶 I 是一種具有底物結構選擇性的酶；該酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物，必須控制酶量和反應時間。
(2)反應溫度超過 42℃時，會增加非特異性核酸酶活性。
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