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產(chǎn)地	國(guó)產(chǎn)	加工定制	否
適用領(lǐng)域	科研	貨號(hào)	BJ-P6683

操作流程

1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。

3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。

4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。

6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7. 儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱(chēng)	英文名稱(chēng)	規(guī)格	貨號(hào)
埃立克體屬通用PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒	Ehrlichiae spp.PCR	多種規(guī)格	BJ-P6683

特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期12個(gè)月。

PCR檢測(cè)試劑盒 (2).jpg

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

三、注意事項(xiàng)

１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專(zhuān)用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。

３．所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。

４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。

2 ug pEZZ18 pEZZ18 低溫運(yùn)輸，-20℃保存哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Columbia Blood Agar Base營(yíng)養(yǎng)非常豐富，用各種細(xì)菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基(AFNOR EP IDF標(biāo)準(zhǔn))250

1瓶 WPMY-1株 WPMY-1 低溫運(yùn)輸和保存發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Mannitol Ferment Medium250克腸道桿菌的鑒別，細(xì)菌發(fā)酵試驗(yàn)

5 g Glucosamine （胰島素抵抗誘導(dǎo)劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 1.56-100 ng/mL 人轉(zhuǎn)錄因子AP-1(Transcription factor AP-1) ELISA試劑盒

雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液（含小倒管） Double Lactose Peptone Broth 10ml*20支/包

D/E中和肉湯 D/E Ｎeutralizing Broth 250g

100mL Tricine Buffer,0.5M pH7.0 Tricine Buffer,0.5M pH7.0 常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Cytotoxic T-lymphocyte protein 4

2 ug TOPFlash TOPFlash 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 病毒通用型(AIV-U)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)

瓊脂培養(yǎng)基J Agar medium J (Deoxycholate citrate agar) 250g

2 ug pCMV-SPORT6 TTC14 pCMV-SPORT6 TTC14 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.156-10 U/mL 人線粒體烏頭酸水合(Aconitase)ELISA試劑盒

1瓶 35.1株 35.1 低溫運(yùn)輸和保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L1

1瓶 NCI-H522株 NCI-H522 低溫運(yùn)輸和保存 12.5-800 pg/mL ELISA Kit for Human Beta-galactosidase

埃立克體屬通用PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒蒼術(shù)酮標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C15H20O 英文名： Atractylon 分子量： 216.32 號(hào)： 6989-21-5 檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)

梣酮標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C14H16O3 英文名： Fraxinellone 分子量： 232.277 號(hào)： 28808-62-0 檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)

查斯曼林標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C25H41NO6 英文名：Chasmanine 分子量：451.6 號(hào)：檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥95% 規(guī)格：10mg 20mg 50mg (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)

異歐前胡素標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C16H14O4 英文名： Isoimperatorin 分子量： 270.28 號(hào)： 482-45-1 檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)

卡枯醇標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C10H10O4 英文名：kakoul 分子量：194.18 號(hào)：18607-90-4 檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)

茶標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C7H14N2O3 英文名：Theanine 分子量：174.21 號(hào)：34271-54-0 檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)

茶黃素標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C29H24O9 英文名：Theaflavin 分子量：516.50 號(hào)：4670-5-7 檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)

茶黃素-3-沒(méi)食子酸酯標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C36H28O16 英文名：Theaflavin-3-Gallate(TF-3-G) 分子量：716.60 號(hào)：30462-34-1 檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)

茶黃素-3＆#146;-沒(méi)食子酸酯標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C36H32O15 英文名：Theaflavin-3＆#146;-Gallate (TF-3＆#146;-G) 分子量：704.63 號(hào)：28543-07-9 檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)