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當前位置：上海邦景實業有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>> 頭孢霉屬通用熒光定量PCR試劑盒探針法
| 產地 | 國產 | 加工定制 | 否 |
|---|---|---|---|
| 適用領域 | 科研 | 貨號 | BJ-P9393 |
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱 | 英文名稱 | 規格 | 貨號 |
頭孢霉屬通用熒光定量PCR試劑盒探針法 | Cephalosporium spp. | 多種規格 | BJ-P9393 |
特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。
二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 １．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 ２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。 ３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 ４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 ５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。 ６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 ７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
100mL SSC溶液,20× SSC, 20× 常溫
2 ug pIND pIND 低溫運輸，-20℃保存
溶血（0.1%）赫氏瓊脂 Hottinger's Agar 250g
1瓶 MEG-01細胞株 MEG-01 低溫運輸和保存
醇麥康凱瓊脂添加劑 Sorbitol MacConkey Agar Additives 1ml*5
50mg 酐 ( 牛紅血球 ) Carbonic Anhydrase 4℃保存
1000mL SSC,20X SSC,20X 常溫保存
1瓶 BaF3細胞株 BaF3 低溫運輸和保存
2 ug pSilencer 4.1-CMV puro pSilencer 4.1-CMV puro 低溫運輸，-20℃保存
25次 一站式全血mRNAout One-Stop Blood mRNA Isolation Kit 4℃保存
2 ug pCMV-HA-N pCMV-HA-N 低溫運輸，-20℃保存
頭孢霉屬通用熒光定量PCR試劑盒探針法甲型流感 H1N1 (Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)大鼠甘油醛-3-脫氫(GAPDH)免疫試劑盒現貨供應
甲型流感 H1N1 (Texas/05/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)大鼠甘露糖寡糖1,2-α-甘露糖苷IA(MAN1A1)免疫試劑盒*直銷
甲型流感 H1N1 (England/195/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)大鼠甘膽酸(CG)免疫試劑盒進口、組裝
甲型流感 H17N10 (little yellow-shouldered bat/Guatemala/164/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)免疫試劑盒進口、分裝
甲型流感 H12N3 (bar headed goose/Mongolia/143/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)大鼠甘免疫試劑盒現貨供應
甲型流感 H9N2 (Hong Kong/3239/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)大鼠干細胞因子受體(SCFR)免疫試劑盒*直銷
甲型流感 H5N1 (Hubei/1/2010) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)大鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)免疫試劑盒進口、組裝
甲型流感 H5N1 (Egypt/3300-NAMRU3/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)大鼠干擾素誘導蛋白11(IP-11/CXCL11)免疫試劑盒進口、分裝
甲型流感 H5N1 (Egypt/2321-NAMRU3/2007)神經 (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)大鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒現貨供應
甲型流感 H9N2 (HongKong/1073/99)神經 (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)大鼠鈣衛蛋白(CALP)免疫試劑盒*直銷
甲型流感 H12N5 (green-winged teal/ALB/199/1991) 神經 (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆大鼠鈣網蛋白(CRT)免疫試劑盒進口、組裝
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