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酸性臺氏液說明書

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更新時間:2022-09-08 15:34:40瀏覽次數:124次

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貨號 BJ-01R3486
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Rap2A Rap2A抗體 規格: 0.2mlATE1 tRNA的蛋白轉移1抗體 規格: 0.2mlInhibin beta B 抑制素βB/Inhibin β B抗體 規格: 0.1mlRabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgM 規格: 0.1mlCCP 瓜環肽抗體 規格: 0.2ml

公司產品具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱:酸性臺氏液說明書

貨號:BJ-01R3486

規格:100ml

分類:細胞其他

儲存條件:4℃,3個月

用途:酸性臺氏液英文全稱為Acid Tyrode's Solution,簡稱AT Solution,用于小鼠胚胎透明帶的去除實驗。pH為2.5。

注意事項:無菌溶液。由氯化鈉、、氯化鈣、氯化鎂、聚乙烯吡咯烷酮40000、葡萄糖等組成,經過濾除菌處理,pH2.5左右。

注意事項:

1、盡注意無菌操作,避免污染。

2、避免反復凍融。

3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

標準溶液的配制:

1.直接配制法    對于純凈的物質(稱做基準物質)可準確進行稱量,用蒸餾水溶解后,轉移到一定容積的容量瓶中稀釋至標線,溶液的準確濃度可以直接計算出來。溶質的純度、性質等對濃度有較大影響,為此,對用來直接配制標準溶液用的基準物質必須具備以下條件:

(1)物質的純度要高,含量不得低于99.9%,雜質的含量應當少到可以忽略的程度。

(2)物質的分子組成應與其化學式*符合,包括結水合物中的結品水含量也必須與其化學式相符合。如硼砂Na2B4O7·10H2O等。

(3)性質穩定,貯蔵時應不發生變化,不易吸收空氣中的水分、二氧化碳等氣體而改變其成分,不易風化潮解和被空氣氧化,烘干時不易分解等。此外最好使用分子量較大的基準物質以減小稱量誤差。

2.間接配制法    凡不符合基準物質條件的物質,可先配制成近似所需濃度的溶液,再用基準物質溶液或能與其發生定量反應的標準溶液進行滴定,求其準確濃度,這種通過滴定來確定準確濃度的操作叫做“標定"。間接法配制近似濃度溶液時不需用分析天平稱量和容量瓶配制,可用臺秤、量筒等器皿。將稱好的物質轉移到干凈的試劑瓶中,先加少量蒸餾水將其溶解,繼續用量筒加蒸餾水至需要量即可。由于大多數試劑不符合基準物的條件,故間接法配制標準溶液是經常的。如固體NaOH因易吸收空氣中的水分而潮解和吸收CO2使表面變質;濃鹽酸因易揮發而無法準確稱量;不易得到分析純級的試劑等,這些物質的標準溶液須用間接法來配制,經標定后再做標準溶液使用。

2.png 

標準溶液的標定:

1.用基準物質標定法

(1)多次稱量法    用減重法精密稱取幾份(如2~3份)基準物質,分別倒入編號的干凈錐形瓶(或燒杯)內,各加少量蒸餾水溶解,再加指示劑后分別用待標定溶液滴定至等當點,各自記錄所消耗待標定溶液的體積,結合基準物質的重量分別算出溶液的準確濃度,最后取平均值做為標準溶液的濃度。

(2)移液管法    精密稱取一份基準物質,在干凈的小燒杯內加少量蒸餾水溶解,順玻棒全部轉移到已校正好的容量瓶中,多次沖洗燒杯洗液并入容量瓶中,最后配成一定體積的溶液,混勻。每次滴定用配套的移液管吸取并轉移至錐形瓶中,加指示劑后用待標定溶液滴定至等當點,每次做好記錄,根據所消耗待標定溶液的體積,結合基準物質的重量,分別算出溶液的準確濃度取平均值做為標準溶液的濃度。

2.比較法標定    如果待標定溶液能與某標準溶液進行反應,可吸量一定體積的某標準溶液,用待標定溶液滴定,或吸量一定體積的待標定溶液,用某標準溶液滴定。根據兩溶液所消耗的毫升數及某標準溶液的濃度,按N1V1=N2V2式可以計算出待標定溶液的準確濃度。這種用標準落液來測定待標定溶液準確濃度的過程稱為“比較法"標定。如果某標準溶液的濃度由于某些原因不夠準確時,就會直接影響待標定溶液濃度的準確性,顯然比較法不如用基準物質直接標定的方法精確,但比較法簡便易行。

標定完畢,蓋緊標準溶液試劑瓶塞,瓶簽上注明標準溶液名稱、準確濃度和日期等。

Yersinia pseudotuberculosis假結核耶爾森探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周BEND6  BEND6蛋白抗體 規格: 0.2mlphospho-SLAMF1(Tyr281)  磷酸化信號淋巴細胞活化分子CD150抗體 規格: 0.1ml

Fructus cnidii蛇床子探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-4周Rabbit Anti-horse IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗馬IgG 規格: 0.1mlRbms3  抑基因Rbms3抗體 規格: 0.1ml

Mycobacterium spp.分枝桿屬通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周DECTIN 2  C型凝集素結構域家族6成員A抗體 規格: 0.1ml

Zika Virus(ZIKV)寨卡病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周Kazrin  Kazrin蛋白抗體 規格: 0.2ml

Rhizoma smilacis glabrae土茯苓探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-4周ANKRD1/CARP  心肌錨蛋白重復結構域1抗體 規格: 0.2ml

Bunyamwera Virus布尼亞維拉病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周Insulin Receptor alpha  胰島素受體α抗體 規格: 0.1ml

Tick-borne Encephalitis Virus(TBEV)蜱傳腦炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周CNTFR-α  睫狀神經營養因子受體α抗體 規格: 0.1ml

Pseudomonas syringae pv. glycinea丁香假單胞桿大豆致病變種PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周8-OHdG  8-羥基脫氧鳥苷抗體 0.1ml

Fructus momordicae羅漢果PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-4周Goat Anti-Mouse IgG/Bio  標記的羊抗小鼠IgG 規格: 0.1ml

Aspergillus flavus黃曲霉LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周NRXN3  軸突蛋白3抗體 規格: 0.1ml

酸性臺氏液說明書6-(標準品) 質量規格:HPLC>98%,標準品 6-TG/Thioguanine 人黑色素瘤細胞英文名稱:M14

1-酞 質量規格:進口原裝,>98% 1-Naphtholphthalein 豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

知母皂苷B 訂購|咨詢 規格: HPLC≥98%,20mg/vial 顱面部發育蛋白1抗體 T ELISA Kit 睪(T)ELISA試劑盒

次堿 訂購|咨詢 規格: 20mg GSK-3結合蛋白FRAT2抗體 MYO5A ELISA Kit 肌球蛋白ⅤA(MYO5A)ELISA試劑盒

飛蓬酯 訂購|咨詢 規格: HPLC≥98%;20mg 補體C1q和腫瘤壞死因子相關蛋白5抗體 ADC ELISA Kit 精氨脫羧(ADC)ELISA試劑盒

魚精DNA 質量規格:進分,Sigma74782,蛋白小于1% DNA, Fishsperm BABL/C小鼠胚胎細胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

三唑 對照品 訂購|咨詢 規格: 100mg;99.8% BTB/POZ結構域蛋白19抗體 PMLC ELISA Kit 化肌球蛋白輕鏈(PMLC)ELISA試劑盒

dGTP;三脫氧鳥苷鈉鹽 質量規格:>98%,BR 2'-Deoxyguanosine 5'-triphosphate trisodium salt  D283 Med(人腦髓母細胞瘤細胞)休哈塔假絲酵母 Candida shehatae

銀杏J;Ginkgolide J 訂購|咨詢 規格: 20mg 羥基類固脫11β1抗體 CLDN24 ELISA Kit 封閉蛋白24(CLDN24)ELISA試劑盒

小諾  英文名稱:Micronomicin   保存:-20℃   規格:200mg 軸突蛋白2抗體  

訂購|咨詢 規格: 20mg 整合素樣金屬與樣4蛋白抗體 Ferritin ELISA Kit 鐵蛋白(Ferritin)ELISA試劑盒

苊(標準品) 質量規格:分析標準品 Acenaphthylene PC-3M(人前列腺細胞)5×106cells/瓶×2

對羥基 訂購|咨詢 規格: HPLC≥98%;20mg 轉錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體 SAA4 ELISA Kit 血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)ELISA試劑盒

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1)     轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5) 之后更換正常培養基培養即可。

 


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