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原代細胞與傳代細胞培養不同點分析2023/10/5
區別一：定義不同原代細胞培養：原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首培養，也叫初代培養。傳代細胞培養：傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養的過程。對單...
擴增曲線的四個時期解釋2023/9/25
擴增曲線是描述PCR動態進程的曲線，以循環數為橫坐標，以反應過程中實時熒光信號強度為縱坐標。理論上PCR過程中反應產物是以指數增長的，但隨著PCR循環數的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反...
PCR反應結果無擴增條帶分析2023/9/18
PCR反應結果無擴增條帶分析:1、酶失活或在反應體系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或運輸不當而失活，往往通過更換新酶或用另一來源的酶以獲得滿意的結果。2、模板含有雜質。特別是對甲醛固定及石蠟包埋...
細胞凍存及復蘇操作步驟2023/9/11
細胞凍存及復蘇操作步驟：一、凍存1、消化細胞，將細胞懸液收集至離心管中。2、1000rpm離心10分鐘，棄上清液。3、沉淀加含保護液的培養，計數，調整至5×106/ml左右。4、將懸液分至凍存管中，每...
PCR反應循環參數注釋2023/9/8
循環參數:1.預變性模板DNAwan全變性與PCR酶的wan全激活對PCR能否成功至關重要，建議加熱時間參考試劑說明書，一般未修飾的Taq酶激活時間為兩分鐘。2.變性步驟循環中一般95℃，30秒足以使...
單克隆抗體的性質鑒定方法2023/8/28
當獲得多個雜交瘤細胞株時，要了解哪一株是zui適用的，則一定要通過各種鑒定。分析常見的方法有：（一）Ig類型測定通常以免抗小鼠Ig類及亞類抗體與培養液中單克隆抗體按雙向瓊脂擴散法進行測定，確定其Ig類...
胎牛血清質控外觀判定要素2023/8/21
拿到血清，zui先接觸的是血清外觀，對于缺少細胞培養經驗的人來說，外觀的判斷尤為重要。1、顏色根據血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現出黃色或紅色，我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl，實際上...
大鼠子宮內膜基質細胞操作要點2023/8/17
大鼠子宮內膜基質細胞操作要點：1、將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。2、將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37...
熒光定量PCR擴增曲線四個時期2023/8/7
擴增曲線是描述PCR動態進程的曲線，以循環數為橫坐標，以反應過程中實時熒光信號強度為縱坐標。理論上PCR過程中反應產物是以指數增長的，但隨著PCR循環數的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反...
抗原幾個基本條件2023/8/1
構成抗原的基本性質，一般須具備如下幾個基本條件：異源物質、有一定的分子量、有較復雜的分子結構、特異性。1、異源物質：在正常情況下，只有異體物質進入體內才可能具有免疫原性。一般說，這種異體物質必須是動物...
ELISA樣品處理和移液技術注意事項2023/7/17
試劑和樣品處理不當或儲存不正確會影響下游分析，因為不同的緩沖劑和試劑會有不同的儲存要求。例如，有些必須儲存在冰箱里，有些在室溫下，有些用感光罩（如鋁箔）。如果有計劃在未來的實驗中使用相同的樣品，那么應...
探究酶的特性實驗材料及選擇鑒定的試劑2023/7/10
酶的特性包括酶的高效性、酶的專一性、作用條件較溫和（溫度和PH對酶的活性有影響）。常見的實驗材料及選擇鑒定的試劑：1、H2O2：過氧化氫在FeCl3和過氧化氫酶的催化及高溫條件下分解，可通過觀察氣泡的...
小鼠骨形成蛋白（BMPs）ELISA試劑盒實驗注意事項2023/6/26
小鼠骨形成蛋白（BMPs）ELISA試劑盒實驗注意事項：1、試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。2、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。3、...
大鼠肝細胞培養基本條件2023/6/12
大鼠肝細胞培養基本條件：1、合適的細胞培養基合適的小鼠源細胞培養基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一，培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質，而且還提供培養細胞生長和繁殖的生存環境。2、優...
貼壁細胞傳代參考2023/6/5
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-...
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