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貨號 | FS-01S63818 |
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產品名稱:漆酶檢測試劑盒可見分光光度法
規格:50管/24樣
檢測方法:可見分光光度法
貨號:FS-01S63818
商品介紹:
測定意義 漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環境污染物降解和木質纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。 測定原理 漆酶分解底物ABTS產生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數遠大于底物ABTS,測定ABTS自由基的增加速率,可計算得漆酶活性。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
HSP10/CPN10 熱休克蛋白10抗體 * 0.2ml
ANGPTL6 血管生成相關蛋白6抗體 * 0.2ml
RCAN2/DSCR1L1 鈣調神經磷調節蛋白2抗體(唐氏綜合征候選區域蛋白1樣蛋白1) * 0.1ml
EDIL3 表皮生長因子樣重復折疊1結構域蛋白3抗體 * 0.2ml
GLMN/FK506 binding protein associated protein FK506結合蛋白相關蛋白抗體(他司相關蛋白) * 0.2ml
Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體 * 0.2ml
MEOX 2 間充質同源盒蛋白2抗體 * 0.2ml
EphA3/Eph receptor A3 酪蛋白激受體A3抗體 * 0.2ml
EphA6/Eph receptor A6 酪蛋白激受體A6抗體 * 0.2ml
EphA7/Eph receptor A7 酪蛋白激受體A7抗體 * 0.2ml
EphA8/Eph receptor A8 酪蛋白激受體A8抗體 * 0.2ml
EphB1/Eph receptor B1 酪蛋白激受體B1抗體 * 0.2ml
phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr317) 磷化酪蛋白激受體B1抗體 * 0.1ml
phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr331) 磷化酪蛋白激受體B1抗體 * 0.1ml
Kidins220 220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體 * 0.2ml
漆酶檢測試劑盒可見分光光度法油 98%DL-N-乙酰高半胱硫內脂 99%IGFBP-1(Human insulin-like growth factors binding protein 1) ELISA Kit 人胰島樣生長因子結合蛋白1
3-基 97%DL-半胱 97%IGF-2(Human insulin-like growth factors 2) ELISA Kit 人胰島樣生長因子2
8-喹啉磺酰氯 98%DL-高胱 98%IGF-1(Human insulin-like growth factors 1) ELISA Kit 人胰島樣生長因子1
2,6-二羥基喹啉 90%DL-高半胱硫內脂鹽鹽 98%IFN- Gamma(Human Interferon Gamma) ELISA Kit 人γ干擾
(R)-N,N-二甲基-1-[(S)-1',2-雙(二基膦基)二茂鐵基]乙 98%N-基甘 97%ICAM-1/CD54(Human intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit 人間粘附分子1
1-庚烷磺鈉 98%,離子色譜級四氮唑乙 98%HGF(Human hepatocyte growth factor) ELISA kit 人肝生長因子
1-己烷磺鈉 離子色譜級,98%氮化鈦 99.5%,2-10 μmGM-CSF(Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒巨噬集落激因子
十二烷基磺鈉 離子對色譜磷氫鈣 AR,99.0 %GDNF(Human glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA KIT 人膠質系來源的神經營養因子
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