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線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-10法)

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產品型號

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 14:10:07瀏覽次數:246次

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貨號 FS-X9733
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-10法)正在熱銷的產品:CD158e NK抑制性受體3DL1抗體五 99%,用于植物培養
CD167a/DDR1 CD167a抗體五標準溶液 0.1mg/ml
CD169/sialoadhesin 唾液結合性免疫球蛋白樣凝集1抗體五 ,99%
CD170/Siglec-5 唾液結合性免疫球蛋白樣凝集5抗體五標準溶液 100μg/ml,u=2%
CD177/NB

產品介紹:

用途:

細胞凋亡的生物化學分析,線粒體膜電位檢測

注意事項:

主要由JC-10染料儲存液,JC-10 buffer、CCCP等組成,可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位,采用FACS檢測。

儲存條件:-20℃,避光,12個月

中文名稱:線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-10法)

英文名稱:

產品規格:100T

貨號:FS-X9733

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

Tau蛋白(TAU)英文名:TAU 溴脫氧尿苷抗體包裝5g

Slit2(Slit2)英文名:Slit2 B遷移基因2抗體包裝1g

SCAF11蛋白(SFRS2IP/P11)英文名:SFRS2IP/P11 骨形態發生蛋白2抗體包裝250mg

S100鈣結合蛋白A8/A9復合物(S100A8/A9)英文名:S100A8/A9 骨形態發生蛋白7抗體包裝1g

S100蛋白(S-100)英文名:S-100 β-連環蛋白/β-連環/β鏈接抗體包裝10MG

S100-B蛋白(S100B)英文名:S100B β-連環蛋白/β-連環/β鏈接抗體包裝250mg

S100B蛋白(S100B)英文名:S100B 癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體包裝1g

RAR的相關孤獨受體C(RORC)英文名:RORC 血型抗原前體蛋白抗體包裝5g

Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)英文名:Qa-2 凱爾血型糖蛋白CD238抗體包裝1g

P選擇糖蛋白配體1(PSGL-1)英文名:PSGL-1 嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2抗體包裝250mg

P選擇(P-Selectin/CD62P)英文名:P-Selectin/CD62P 骨形態發生蛋白10抗體包裝250mg

P物質受體(SP-R)英文名:SP-R 溴脫氧尿苷單克抗體(增殖標志物)包裝1g

P物質(SP)英文名:SP BEND2蛋白抗體包裝25g

P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)英文名:P-gp 骨涎蛋白包裝5g

p53(p53)英文名:p53 副溶血性弧菌菌體鞭毛蛋白抗體包裝1g

血管緊張Ⅱ受體2抗體肝核因子1α(HNF1α)Capadenoson (BAY 68-4986) is a new adenosine A1 receptor agonist.
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-10法)Salinicoccus alkaliphilus 4-氟-3,5二可溶性肝X受體

Pilidium concavum 5-氟-2-甲氧基-4-嘧啶可溶性共激分子4

金頂側耳(榆黃蘑) N-4-BOC-哌-2-乙酸甲酯可溶性核因子κB受體活化因子配基

褐球固氮 (R)-3-(甲基氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1

釀酒酵母 -3-乙酸甲酯可溶性瘦受體

竹喙球 6-溴-2-苯并噁唑酮可溶性髓系觸發受體-1

釀酒酵母 異鈮 w/v in isopropanol/hexane (50:50), 99% (metal可溶性糖蛋白130

粉肉色杯傘 2-[4-(2-吡啶基)芐基]-肼羧酸叔丁酯可溶性晚期糖基化終末產物受體

越南芽孢桿 3-溴-2-羥基-4-可溶性間粘附分子1

腸球屬 2-甲酰可溶性胸苷激1

互生枝頂孢 3-甲可溶性血管內皮生長因子受體1

解鳥拉烏爾 2-三氟甲氧基芐溴可溶性血管內皮蛋白C受體

香菇 2-溴-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙酮可溶性血管內皮生長因子受體1

腐皮鐮孢 2-環戊基-2-羥基甲酯可溶性血管內皮生長因子受體2

大腸埃希氏 2-氨基-4,5-雙(2-甲氧基乙氧基)鹽酸鹽可溶性血管內皮粘附分子1

 


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