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貨號 | FS-X9932 |
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中文名稱:精子形態學染色液(巴氏法)
英文名稱:
產品規格:4×20ml|4×100ml|4×500ml
貨號:FS-X9932
產品介紹:
用途: 用于精子形態分析,評估畸形率 注意事項: 本染色方法系WHO推薦Diff-Quik染色法,因精子及細胞內不同等電點的蛋白質在相同的酸度下帶不同的電荷,能選擇性地結合相應的染料而著色。 儲存條件:室溫,12個月 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
淡紫灰鏈霉菌骨架銜接蛋白BIN3抗體Human GEF-H1 小鼠opiorphin 免疫試劑盒
假絲酵母屬雙向染色體分裂蛋白1抗體Human GDPD5 小鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)免疫試劑盒
產氣莢膜梭菌 D型轉錄因子Brn3蛋白抗體Brn3αHuman GFPT1 小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖(NAG)免疫試劑盒
泡盛曲霉骨形態發生蛋白6抗體Human GDPD2 小鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒
磚紅鐮孢菌腦鈉抗體Human GEFT 小鼠NANOG同源域蛋白(NANOG)免疫試劑盒
猴假單胞菌骨形態發生蛋白3抗體Human GEM 小鼠NAD依賴性蛋白脫乙酰sirtuin-1(SIRT1)免疫試劑盒
毛柄金錢菌(金針菇)抑凋亡基因bag1抗體Human GEMIN5 小鼠NADPH氧化1(NOX1)免疫試劑盒
阿魏側耳蛙皮受體3抗體Human GEMIN4 小鼠M型肌激(CKM)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌骨形態發生蛋白8抗體Human GEMIN6 小鼠MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)免疫試劑盒
牡丹擬盤多毛孢菌骨形態發生蛋白6抗體Human GEMIN7 小鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)免疫試劑盒
黑曲霉磷化Bcl-2抗體Human GEMIN4 小鼠L-乳脫氫A鏈(LDH-A)免疫試劑盒
植物乳桿菌磷化Bcl-2抗體Human GDAP2 小鼠L解(PAL)免疫試劑盒
谷棒桿菌磷化Bcl-xL蛋白抗體Human GDAP1L1 小鼠Klotho 免疫試劑盒
大腸埃希氏菌神經母瘤相關蛋白ARID3B抗體Human GDE1 小鼠KI-67抗原(MKI67)免疫試劑盒
凍干粉 產腸大腸埃希氏菌(陽性) 微管蛋白β4抗體Human GDAP1L1 小鼠I型膠原蛋白免疫試劑盒
光滑青霉霍亂腸β鏈抗體Human GBP4 小鼠III型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒
考克氏菌Kocuria│sp. 質量規格:BRβ2糖蛋白試劑盒芹糖異甘草
匍枝根霉Rhizopus│stolonifer 質量規格:BRβ1腎上腺能受體試劑盒芹菜-7-0-(2G-鼠李糖)龍膽糖
土曲霉原變種Aspergillus│terreus var. terreus 質量規格:>98% (HPLC),BCβ1,4-N-乙酰基半乳糖轉移2試劑盒5-羥色
精子形態學染色液(巴氏法)葉生布勒擔子酵母 雜氮雙環磷酯葡糖氨基聚糖
谷棒桿 3-乙酰基-6-咪唑并[1,2-B]噠多配體聚糖-1
大腸埃希氏 抗氧劑 LK-1081Ras三磷鳥激活樣蛋白
柔嫩艾美耳球蟲 2--4-肼血管抑
Methylobacterium variabile 3-乙氧基苯吡啶并林
金耳 2,3-二甲氧基磷脂酰肌抗體
DB (彌漫大B瘤) (通過STR鑒定) 8-氨基-6-甲氧基喹啉抗磷脂酰絲凝血原復合物IgG抗體
炭疽芽胞桿 聚乙烯肉桂酯抗磷脂酰絲凝血原復合物IgM抗體
*蛹蟲草 肉堿富馬鹽凝血IgG抗體
離中不粘柄 3--5-氟芐凝血IgM抗體
海洋沉積物芽孢桿 3,5-二氟苯布魯氏桿IgG抗體
彎曲假單胞 N-甲基-3-氟芐布魯氏桿IgM抗體
果生鏈核盤 (3S,4S)-1-芐基吡咯烷-3,4-二布魯氏桿IgA抗體
芽胞桿 2-羥基-2-甲基-N-[4-基--3-(三氟甲基)苯基]-3-[4-(氟苯基)硫]酰B瘤因子3
生黑鏈霉 1,2-環氧-2-甲基-N-[4-基--3-(三氟甲基)苯基]-烯酰肝配蛋白A1
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