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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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布氏桿菌染色液

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-16 16:08:41瀏覽次數(shù):186次

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貨號(hào) FS-X10122
布氏桿菌染色液正在熱銷的產(chǎn)品:CCL27/CTACK/FITC 熒光標(biāo)記皮膚T虜獲趨化因子抗體IgGDL-絲氨 98%
CCL26/FITC 熒光標(biāo)記抗嗜粒趨化蛋白3抗體IgG肌氨酯鹽鹽 BR
CCL28/FITC 熒光標(biāo)記粘膜相關(guān)上皮趨化因子MEC抗體IgGDL-絲氨酯鹽鹽 98%
CCP/FITC 熒光標(biāo)記兔抗瓜氨環(huán)肽抗體IgGD-蘇氨 99%
CCR-1/FITC 熒光標(biāo)記趨化因子

產(chǎn)品介紹:

用途:

布氏桿菌染色,又稱為科茲洛夫斯基染色或柯茲洛夫斯基染色。

注意事項(xiàng):

染色結(jié)果為:布氏桿菌呈球桿狀,淡紅色,其他呈綠色。

儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月

中文名稱:布氏桿菌染色液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml|2×100ml

貨號(hào):FS-X10122

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

薄層菌屬絲裂原活化蛋白激3抗體Human INPPL1 (Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase 2) 犬組織因子(TF)免疫試劑盒

總狀毛霉雌激受體α抗體Human HCAR3 (Hydroxycarboxylic acid receptor 3) 犬組(HIS)免疫試劑盒

土壤短芽胞桿菌雌激受體β 抗體Human UGT1A6(UDP-glucuronosyltransferase 1-6) 犬轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒

根霉上皮特異性抗原抗體Human IPMK (Inositol polyphosphate multikinase) 犬腫瘤壞死因子α(TNF-α )免疫試劑盒

頭孢霉內(nèi)皮-1抗體Human INPPL1 (Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase 2) 犬脂多糖/內(nèi)(LPS)免疫試劑盒

黑曲霉天冬蛋白家族蛋白抗體Human UGT1A6(UDP-glucuronosyltransferase 1-6) 犬脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒

迂回殼囊孢蝮蛇蛇蛋白抗體Human HCAR2 (Hydroxycarboxylic acid receptor 2) 犬孕激/孕(PROG)免疫試劑盒

巴貝斯蟲未定種(伊寧株)轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體Human HCAR3 (Hydroxycarboxylic acid receptor 3) 犬誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒

天麻蜜環(huán)菌A9*內(nèi)皮受體蛋白酪激抗體Human INSM1(Insulinoma-associated protein 1) 犬游離脂肪(FFA)免疫試劑盒

棒彎孢酪蛋白激受體B2抗體Human HMGCS2 (Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, mitochondrial) 犬游離狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒

蠟狀芽孢桿菌磷化雌激受體ER alpha 抗體Human INSM2 (Insulinoma-associated protein 2) 犬游離甲狀腺(FT4)免疫試劑盒

須芒草伯克霍爾德氏菌重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白抗體Human HEMK1 (HemK methyltransferase family member 1) 犬抑制β-B(Inhbb)免疫試劑盒

綠針假單胞菌雌激受體α抗體(用于western blot)Human HRAS(GTPase HRas) 犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)免疫試劑盒

雞葡萄球菌雌激受體α/β抗體Human HSD17B1(Estradiol 17-beta-dehydrogenase 1) 犬乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒

擬枝孢鐮孢自分泌運(yùn)動(dòng)因子抗體Human IL1RL2 (Interleukin-1 receptor-like 2) 犬胰腺甘油三酯脂(PNLIP)免疫試劑盒

平菇—紫孢側(cè)耳酪蛋白激A3受體抗體Human UGT1A1(UDP-glucuronosyltransferase 1-1) 犬胰高血糖樣肽1(GLP1)免疫試劑盒

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%吳茱萸總堿

假蜜環(huán)菌Armillariella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%蘇糖

副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%阿卡波糖
布氏桿菌染色液松口蘑 3,4,5-三苯中性蛋白

巴斯德畢赤酵母 3-甲基噻吩抗壞血氧化

滑假絲酵母 N-氨基-3-氮雜雙環(huán)[3.3.0]辛烷鹽鹽D-半乳糖酯還原

糙皮側(cè)耳 3,4-二肌加氧

孢籃狀 4-氨基-3-溴三氟甲苯麥角蛋白

美澳型核果褐腐病 4-羥基-2-甲姜辣

海境芽孢桿 5-羥基-2-甲果聚糖

大腸埃希 磺脒Na-K-ATP

鄰單胞屬* 枸櫞鉍葡萄糖

葡萄座腔 D-對(duì)羥基苯甘甲酯鹽鹽木質(zhì)

大腸埃希 2-甲酯類黃酮葡萄糖轉(zhuǎn)移

動(dòng)物源細(xì)耐藥性檢測(cè)板-金黃色葡球 5,5-二苯基海因霉

矩圓黑盤孢 4--3-溴甲苯ataxin-3抗體

卡爾斯伯酵母 2-甲氧基苯過氧化物

黃曲霉 4-甲苯果糖-1,6-二磷縮

 


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