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Luxol Fast Blue染色液

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具體成交價以合同協議為準

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 15:30:04瀏覽次數:153次

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貨號 FS-X10060
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Zfp91 白血病相關新因抗體1,2,4-丁三 98%
ZNF217 鋅指脂蛋白217

產品介紹:

用途:

又稱監牢藍髓鞘染色,石蠟切片

注意事項:

分化步驟很重要,染色結果為:髓鞘呈藍綠色,細胞核呈紅色。

儲存條件:室溫,避光,12個月

中文名稱:Luxol Fast Blue染色液

英文名稱:

產品規格:50ml

貨號:FS-X10060

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

白淺灰鏈霉菌分裂周期蛋白16抗體Human UCP1(Mitochondrial brown fat uncoupling protein 1) 人肌酐(Cr)免疫試劑盒

花園芽孢桿菌有絲分裂著絲粒蛋白F抗體Human COQ10B(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog B, mitochondrial) 人饑餓激(GHRL)免疫試劑盒

蘇云金芽胞桿菌松蠋亞種9號染色體開放閱讀框115抗體Human QPCTL(Glutaminyl-peptide cyclotransferase-like protein) 人活性氧(ROS)免疫試劑盒

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松針散斑殼卷曲螺旋結構域蛋白92抗體Human DNMT1(DNA(cytosine-5)-methyltransferase 1) 人黃體生成(LH)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD8抗體Human GREM1(Gremlin-1) 人氧化(XOD)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌大腦亮拉鏈結構域蛋白抗體Human TERT(omerase reverse transcriptase) 人環磷腺(cAMP)免疫試劑盒

嚙蝕艾肯氏菌卷曲螺旋結構域蛋白93抗體Human IL17B(Interleukin-17B) 人環磷鳥(cGMP)免疫試劑盒

星孢鏈霉菌卷曲螺旋結構域蛋白96抗體Human TLN1(Talin-1) 人環加氧2(COX-2)免疫試劑盒

型副傷門菌Salmonella│paratyphi A 質量規格:指示劑級紫萁

假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質量規格:分析標準品,99.96%漿苦味L

: HBUM73202資源名稱: 鏈霉菌 質量規格:IND相思子堿
Luxol Fast Blue染色液動物雙歧桿 對甲苯酰核糖核A1

巴氏醋桿羅旺亞種 1,1'-雙(二-叔丁基膦基)二茂鐵尿二磷葡萄糖轉移

光帽磷傘 3-硝基芐高爾基體膜蛋白

芽胞桿 3-乙氧基烯復合型表皮生長因子樣結構域蛋白8

尖鐮孢黃瓜專化型(黃瓜枯萎病) 2-(1-萘基)-5-苯基噁唑低密度脂蛋白受體相關蛋白2

多布克魯維酵母 3,4-二氨基血紅蛋白β亞基

白僵 3-甲酯跨膜受體蛋白Notch-2

樟疫霉 4-芐氧基-3-苯Ⅴ型膠原α2

醋化醋桿 3-溴甲酯LINGO1

釀酒酵母 3,5-二溴O-連鎖-N-乙酰葡糖基轉移

檸檬兩面神 2--4-氟-5-DNA甲基轉移3L

熱線鏈霉 4-基-3-氟苯口腔癌致病基因BPIFB2

膠孢 3-(丁基苯氨基)錨蛋白

小孢擬棘殼孢 5,7-二氟-1-印酮脫氫3家族成員A1

沉積物假海源桿 環烷鈣腎小管間質腎炎抗原

 


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