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貨號 | FS-X9843 |
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產品介紹:
通過結晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物,革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯致密,故遇乙醇或脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙,因此能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差,在遇脫色劑后,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出,因此通過乙醇脫色后仍呈無色,再經沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。 儲存條件:室溫密封保存。 有效期:一年。 |
中文名稱:革蘭氏染色試劑盒
英文名稱:
產品規格:200ml
貨號:FS-X9843
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
索地平英文名: Imiquimod間粘附分子-1抗體包裝5g
哚普利英文名: Imiquimod間粘附分子-1抗體包裝25g
英文名: Irinotecan間粘附分子-1抗體包裝5g
匹莫丹英文名: Irinotecan親環蛋白(親環)PPIF抗體包裝1g
普伐他丁鈉英文名: Irinotecan HCl Trihydrate過氧化氫抗體包裝1g
普拉格雷英文名: Irinotecan HCl Trihydrate內離子通道蛋白4抗體包裝5g
羅布考英文名: Isoconazole Nitrate生長調控蛋白19/環指蛋白197抗體包裝25g
氫噻英文名: Isoconazole Nitrate卷曲螺旋結構域蛋白139抗體包裝5g
匹地爾英文名: Isotretinoin染色體修飾蛋白1抗體(金屬蛋白1)包裝1g
群多普利英文名: Isotretinoin鈣依賴分泌激活蛋白1抗體包裝250mg
舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣英文名: Meropenem trihydrate小腦肽1抗體包裝1g
嘧達莫英文名: Meropenem trihydrate小腦肽2抗體包裝250mg
替卡格雷英文名: Kanamycin mono sulfate小腦肽4抗體包裝100g
米沙坦英文名: Kanamycin mono sulfate腦海綿狀血管畸形蛋白2抗體包裝25g
舍林鹽英文名: Ketanserin Tartrate表皮生長因子樣蛋白2抗體包裝1g
焦曲霉Aspergillus│ustus 質量規格:HPLC>99%,標準品氧化低密度脂蛋白試劑盒柚皮;Naringenin
石油棲熱腔菌Thermosipho│geolei 質量規格:>99%延伸蛋白A試劑盒楊梅;Myricetin
索馬里鏈霉菌Streptomyces│somaliensis 質量規格:>99%煙酰腺二核磷試劑盒異皮啶;Isofraxidin
革蘭氏染色試劑盒太平洋大洋桿狀 分散橙37亮氨肽3
堅脆嗜熱子囊 2-氨基-6-苯并噻唑可溶性CD44分子
環狀芽胞桿 鄰苯二甲單丁酯趨化因子配體2
德氏乳桿保加利亞亞種 馬波沙星嗜性粒主要堿性蛋白
鮮綠青霉 芥細小病B19-IgG抗體
金龜子綠僵* 5-氨基苯并咪唑酮JOE因子
平菇 十一CD47蛋白
假單胞屬 丁基三化錫帶3蛋白
腐皮鐮孢 2,5-己二酮抗角蛋白抗體
黑曲霉 苯己烷促泌
毛韌革 乙二硫代S-甲基轉移
莫哈韋芽孢桿 氟菊酯早期分泌抗原靶6
枯草芽孢桿 苯靈血管性血友病因子裂解
盤孢屬 4-羥基-4'-異氧基二苯砜絨毛膜促性腺α
黃孢平革 沙拉沙星乙型肝炎病19
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