13524666654
當前位置：上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> 碘化丙啶染液(1mg/ml)
| 貨號 | FS-X9638 |
|---|
產品介紹:
本品是溶于水的PI儲存液，濃度為1mg/ml，只需用合適的緩沖液稀釋到工作液即可。 碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一種常用的細胞核熒光染料，作為一種溴化乙錠（EB）的類似物，能夠嵌入堿基之間實現與DNA結合。這種結合沒有或者幾乎無序列傾向性，大約每4-5個DNA堿基對結合一個染料。PI也能與RNA結合，需要用核酸酶處理來區分DNA和RNA染色。水溶液中PI的大激發/發射波長是493/636nm。一旦與核酸結合，熒光信號明顯增強20-30倍，大激發波長向紅色波段遷移~30-40nm，大發射波長向藍色波段遷移~15nm，從而使其大激發/發射波長變為535/617nm。PI的摩爾吸光系數相對比較低，但是其具有足夠大的斯托克司頻移來同時檢測核酸DNA和熒光標記抗體，只需要使恰當的濾片。PI適用于熒光顯微鏡，共聚焦顯微鏡，流式細胞儀以及熒光計分析。 PI不能穿透細胞膜而被排斥在活細胞外，但是可以穿過破損的細胞膜而對核染色。利用這一特性，通常與Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活細胞熒光探針一起使用，同時對活細胞和死細胞染色和鑒定，用于細胞凋亡相關的研究。也可以用作多重熒光染色的復染劑，兼容于各種細胞標記技術，包括直接或者間接的熒光抗體檢測，mRNA原位雜交，細胞結構特異性的熒光探針檢測法以及組織染色。PI的單獨染色也可以進行細胞周期的檢測。 ：25535-16-4 分子式：C27H34I2N4 分子量：668.4 純度：≥95% by HPLC 溶解性：溶于水（1mg/ml） 儲存條件：4℃，避光，有效期6個月 |
中文名稱：碘化丙啶染液(1mg/ml)
英文名稱：Propidium Iodide Staining Solution(1mg/ml)
產品規格：1ml
貨號：FS-X9638
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
過氧化物mei體增殖物激活受體γ(PPARγ)檢測試劑盒 forPeroxisomeProliferatorActivatedReceptorGamma(PPARg)
GATA結合蛋白5(GATA5)檢測試劑盒 forGATABindingProtein5(GATA5)
suan性成纖維細胞生長因子(FGF1)檢測試劑盒 forFibroblastGrowthFactor1,Acidic(FGF1)
腫瘤壞死因子α誘導蛋白2(TNFαIP2)檢測試劑盒 forTumorNecrosisFactorAlphaInducedProtein2(TNFaIP2)
雌二chun(E2)檢測試劑盒 forEstradiol(E2)
唾液suan結合Ig樣凝集su1(SIGLEC1)檢測試劑盒 forSialicAcidBindingIgLikeLectin1(SIGLEC1)
亮氨suan豐富重復激mei2(LRRK2)檢測試劑盒 forLeucineRichRepeatKinase2(LRRK2)
四旋蛋白2(TSPAN2)檢測試劑盒 forTetraspanin2(TSPAN2)
載脂蛋白C3(APOC3)檢測試劑盒 forApolipoproteinC3(APOC3)
細胞周期suD3(CCND3)檢測試劑盒 forCyclinD3(CCND3)
免疫球蛋白G1(IgG1)檢測試劑盒 forImmunoglobulinG1(IgG1)
外核suan焦磷suanmei/磷suan二酯mei1(ENPP1)檢測試劑盒 forEctonucleotidePyrophosphatase/Phosphodiesterase1(ENPP1)
全羧mei合成mei(HLCS)檢測試劑盒 forHolocarboxylaseSynthetase(HLCS)
白介su11受體α(IL11Rα)檢測試劑盒 forInterleukin11ReceptorAlpha(IL11Ra)
lv化物細胞內通道蛋白1(CLIC1)檢測試劑盒 forChlorideIntracellularChannelProtein1(CLIC1)
停靠蛋白2(DOK2)檢測試劑盒 forDockingProtein2(DOK2)
糖抗原125(CA125)檢測試劑盒 forCarbohydrateAntigen125(CA125)
碘化丙啶染液(1mg/ml)N-氧化物標準品 規格:50mg 英文名稱：Codeine N-Oxide CI
油suan油chun酯標準品 規格:0．5ml 英文名稱：Oleyl Oleate
jia基亞芐亞基樟腦標準品 規格:200mg 英文名稱：Methyl Benzylidene Camphor
牡荊su標準品 規格:25mg 英文名稱：Vitexin
標準品 規格:200mg 英文名稱：Ribavirin
夸標準品 規格:200mg 英文名稱：Quazepam CIV
鹽suanjia基芐肼標準品 規格:200mg 英文名稱：Procarbazine Hydrochloride
鯨蠟chun標準品 規格:100mg 英文名稱：Cetyl Alcohol
多沙zuo嗪相關雜質D標準品 規格:20mg 英文名稱：
lvjiaben噻嗪標準品 規格:200mg 英文名稱：Diazoxide
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供，信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責，儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規避購買風險，建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。
儀表網