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貨號	FS-X9937

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：酸性固綠染色液

英文名稱：

產品規格：2×50ml

貨號：FS-X9937

產品介紹:

用途：

顯示細胞中堿性蛋白，尤其是組蛋白

儲存條件：室溫，避光，12個月

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

陰溝腸桿菌腦蛋白44樣蛋白抗體Human FYTTD1 小鼠3-硝基酪(3-NT)免疫試劑盒

埋藏曲霉嗜乳脂蛋白樣2抗體Human FXYD4 小鼠3-α羥基類固脫氫(Akr1c9)免疫試劑盒

異常漢遜酵母嗜乳脂蛋白樣8抗體Human FXYD6 小鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)免疫試劑盒

泛枝芽孢桿菌嗜乳脂蛋白樣9抗體Human FXYD7 小鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)免疫試劑盒

野蘑菇BTB/POZ結構域蛋白7抗體Human FUT10 小鼠Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫試劑盒

多根硬皮馬勃腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體Human FYTTD1 小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)免疫試劑盒

相思根瘤菌Bcl2相關轉錄因子抗體Human FUT4 小鼠25羥基維生D3(25 HVD3)免疫試劑盒

乳桿菌屬腦環核門控通道蛋白1抗體Human FUT7 小鼠25羥基膽固(25-OHC)免疫試劑盒

枯草芽胞桿菌癌易感基因復合蛋白4抗體Human FUT11 小鼠20S蛋白體(20SP)免疫試劑盒

豬輪狀病紡錘體檢查點蛋白抗體Human FUT8 小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒

谷棒桿菌有絲分裂檢驗點蛋白BubR1抗體Human FUCA2 小鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)免疫試劑盒

釀酒酵母癌相關蛋白3抗體Human FUK 小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)免疫試劑盒

傘枝犁頭霉癌相關蛋白2抗體Human FUT9 小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)免疫試劑盒

灰褐鏈霉菌癌抗雌激耐藥蛋白1Human Fukutin 小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ) 免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌胞漿支鏈基轉抗體Human FUSIP1 小鼠17-類固(17-KS)免疫試劑盒

線團擬諾卡氏菌磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體Human FUT10 小鼠17羥孕(17-OHP)免疫試劑盒

塔圖姆氏菌屬Tatumella│sp. 質量規格：>98%,BRα-輔肌動蛋白3試劑盒5-羥基-6,7-二氧基黃

假單胞菌Pseudomonas│sp. 質量規格：>98%,BRα-輔肌動蛋白1試劑盒5-羥基-7,8-二氧基黃

諾卡氏菌Nocardia│sp. 質量規格：>95%，BRα-防御4試劑盒去氫荷包牡丹堿
酸性固綠染色液球形芽孢桿葉綠銅鈉鹽戊型肝炎病抗原

地中海擬無枝沙美特羅類白抗原B27

熱帶假絲酵母苯基-β-D-吡喃半乳糖補體因子P

出芽短梗霉 5-氨基異酞單甲酯絲肽抑制因子Kazal型4

空腸彎曲桿芐基苯基碳酯色P4503A4

佛雷德里克斯堡假單胞 2-氨基-6-溴乙型腦炎病IgG抗體

Aurantimonas coralicida 2,6,7-三-3-三氟甲基喹喔啉維甲誘導基因1蛋白

疏水戈登氏 N-異基-4甲類固硫酯

熒光假單胞 9-雙環[3.3.1]壬烷磺基轉移

濟州單胞鄰芐基苯3β羥基5類固脫氫

黑根霉 9-溴-1-壬烯膽固7α羥化

谷棒桿 2-溴-6-羥基吡啶類固17α單加氧

蠟狀芽孢桿 4-(2,2,2-三氟乙氧基)類固異構

油菜核病 4-氨基-2--3-硝基吡啶皮質類固11β脫氫同工1

施氏假單胞 L-乳鋰皮質類固11β脫氫同工2
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)