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貨號 | FS-X9704 |
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中文名稱:Caspase 6抑制劑
英文名稱:
產品規格:200μl
貨號:FS-X9704
產品介紹:
Z-VEID-FMK是一種高效可逆的caspase-6的小分子抑制劑??梢砸种朴蒀aspase 6激活導致的細胞凋亡。Z-VEID-FMK分子式為C31H45FN4O10,分子量為652.7。 Z-VEID-FMK采用進口高品質原料分裝配制,濃度為5mM。本產品適用于需要用到Z-VEID-FMK的各種實驗,請根據不同的實驗需要進行配制和使用,具體請參考相關文獻或實驗指南。 儲存條件:-20℃保存。 有效期:一年。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
抗內皮細胞抗體(AECA)英文名:AECA 載脂蛋白樣蛋白6抗體包裝5g
抗利尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)英文名:ADH/VP/AVP 凋亡相關蛋白TGFb信號抗體包裝100g
抗酒石性磷5b(TRACP-5b)英文名:TRACP-5b A2LD1蛋白抗體包裝25g
抗酒石性磷5b(TRACP5b)英文名:TRACP5b α1,4-N-乙酰葡糖轉移α4Gn-T抗體包裝5g
抗酒石性磷(TRACP)英文名:TRACP 芳香乙酰脫乙酰基抗體包裝10ml
抗抗體(AsAb)英文名:AsAb 芳香乙酰脫乙?;鶚拥鞍?抗體包裝1g
抗狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)英文名:ATGA/TGAB 基乙二半脫氫磷泛酰巰基乙轉移抗體包裝25g
抗狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)英文名:TPO-Ab 賴戊二還原抗體包裝5g
抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)英文名:EMA IgA 錨蛋白重復域6抗體包裝25g
抗環胍肽抗體(Anti-CCP-antibody)英文名:Anti-CCP-antibody 精2抗體包裝5g
抗紅細胞抗體(RBC)英文名:RBC 固還原家族1成員C3抗體包裝1g
抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)英文名:gp210 促腎上腺皮質激受體包裝5g
抗核抗體(ANA)英文名:ANA 褐黑相關蛋白ART抗體包裝1g
抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)英文名:ssDNA 腎上腺皮質線粒體鐵氧還蛋白抗體包裝250mg
抗單核細胞抗體(AMA)英文名:AMA Allgrove綜合征相關蛋白抗體包裝5g
磷化粘附相關激抗體促腎上腺皮質激(ACTH)Erlotinib Hydrochloride (CP-358774 Hydrochloride) 抑制 EGFR 激的 IC5
Caspase 6抑制劑釀酒酵母 N-十八烷基苯甲酰低密度脂蛋白受體相關蛋白6
潮汐紅色桿 (3S,4S)-3-氨基-4-羥基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯低氧誘導因子-1α
釀酒酵母 3-溴-4-甲氧基苯低氧誘導因子-2α
纖維黃鏈霉 間甲苯磺酰抵抗
米川黃桿 2,7-二甲基咔唑凋亡誘導因子
鏈輪枝屬 苯基基氫氧化銨(的甲溶液)凋亡相關因子配體
阪崎腸桿 1-叔丁氧羰基-4-氨基鹽酸鹽丁型肝炎IgG抗體
嗜線蟲賽雷氏 六水六氟硅酸鎂蕈堿型乙酰受體亞型M2抗體
蠟磨屬 5-溴-2-苯甲蕈堿型乙酰受體亞型M3
小海螺 4,5-二氟鄰苯二甲酸端粒
栗疫病 4,5-二氟鄰苯二甲酸酐端粒逆轉錄
肋生鹽弧肋生亞種 1-異基吡唑對稱性二甲基精
教堂小短桿 4-叔丁氧羰基-2-嗎啉甲酸對氧磷
多產色鏈霉 1-Boc-4-甲基-4-甲酸對氧磷1
大腸埃希 3,4-二氟水楊酸多巴
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