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當前位置：上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> AO-EB雙染色試劑盒
| 貨號 | FS-X9741 |
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操作步驟：
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落， 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養液重新懸浮細胞，即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產品屬性：
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit | 50ml*2|250ml*2 | FS-X9741 |
產品介紹：
橙能透過胞膜完整的細胞，嵌入細胞核DNA，與雙鏈DNA結合后發出綠色熒光，溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細胞，嵌入核DNA，發橘紅色熒光。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察，可見四種細胞形態：活細胞(VN)，核染色質著綠色并呈正常結構；早期凋亡細胞(VA)，核染色質著綠色呈固縮狀或圓珠狀；晚期凋亡細胞(NVA)，核染色質為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀；非凋亡的死亡細胞(NVN)，核染色質著橘紅色并呈正常結構。本產品AO、EB 溶液濃度分別為100ug/ml，所含穩定劑不影響實驗效果。 使用方法：（僅供參考） 1、使用前先根據用量，將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，現用現配。 2.1、對于貼壁細胞或爬片，去掉培養基，用 PBS 洗兩遍去除殘余培養基和未貼壁細胞，加入新的 PBS；如果需要觀察全部細胞特性，保留未貼壁細胞，可以直接在培養基中加入工作液。按照每毫升培養基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后，用 PBS 洗 2 次，除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養基于熒光顯微鏡下觀察即可。 2.2、對于懸浮細胞，可直接加入工作液或離心收集細胞后在 PBS 中加入工作液。按照每毫升培養基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后，離心去除工作液，后用 PBS 洗 2 次，除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養基于熒光顯微鏡下觀察即可。 3、建議用藍光激發，視野下可以觀察到死細胞呈現紅色，活細胞呈現綠色。 保存：4℃避光密封保存，有效期一年。 |
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養基，并用新鮮培養基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
質細胞源性神經營養因子(GDNF)英文名：GDNF Bcl-2結合抑凋亡蛋白2抗體包裝250mg
脂氧合同工1(LOX-1)英文名：LOX-1 β淀粉樣肽1-42抗體包裝1g
脂聯(human adiponectin)英文名：human adiponectin 磷化內收蛋白抗體包裝5g
脂聯(Adiponectin/Acrp30)英文名：Adiponectin/Acrp30 程序性死亡配體1抗體包裝250mg
脂聯(Adiponectin,Acrp30)英文名：Adiponectin,Acrp30 程序性死亡配體1抗體包裝1g
脂聯(Adiponectin)英文名：Adiponectin β淀粉樣肽（1-42）抗體包裝5g
脂肪合成(FAS)英文名：FAS β淀粉樣肽（1-42）單克抗體包裝100g
胰島樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)英文名：IGFBP-3 膽汁鹽輸出泵/ATP結合盒轉運蛋白11抗體包裝25g
血小板內皮細胞粘附分子-1(PECAM-1/CD31)英文名：PECAM-1/CD31 BSPRY蛋白抗體包裝5g
血小板內皮細胞粘附分子1(PECAM1)英文名：PECAM1 BAIAP2L2蛋白抗體包裝50mg
血小板/內皮細胞粘附分子-1(PECAM-1/CD31)英文名：PECAM-1/CD31 磷化相關死亡促進因子抗體包裝5MG
血小板/內皮細胞粘附分子1(PECAM1)英文名：PECAM1 磷化相關死亡促進因子抗體包裝25g
胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)英文名：TARC/CCL17 人β亞基人絨毛膜促性腺激(β HCG)抗體包裝5g
胸腺活化調節趨化因子(TAFA/CCL17)英文名：TAFA/CCL17 鈣激活通道蛋白 α 1抗體包裝5ml
纖維連接蛋白(FN)英文名：FN 鈣激活通道蛋白 α 1抗體包裝25g
凋亡增強核抗體干擾α4(IFNα4)Entospletinib (GS-9973) is an orally bioavailable, selective Syk inhibitor with
AO-EB雙染色試劑盒金黃殼囊孢 2,7-二溴-9,9-二癸基芴球蛋白G2a
斑玉蕈 N-芴甲氧羰基-D-2-氨基丁酸球蛋白G2b
金針菇（毛柄、冬菇） 4'--2'-氟苯乙酮球蛋白G3
大腸埃希 2,5-二甲球蛋白G4
藍色犁頭霉 2-溴-1-(2-吡啶基)-1-乙酮 氫球蛋白M
葡萄座腔 4--2,6-二氟苯甲球蛋白κ自由輕鏈
金耳、 黃木耳 氮雜環丁烷-3-酮鹽酸鹽球蛋白λ自由輕鏈
皮特遜畢赤酵母 3-氟-4-球蛋白結合蛋白
黃單胞 1-溴-3,5-二氟-2-苯球蛋白輕鏈kappa抗體
假絲酵母屬 1-(二氟甲基)-2-氟苯球蛋白輕鏈lambda
大腸埃希 酮縮氨基硫脲抑制性糖蛋白
突孢毛殼 1H-吲唑-6-羧酸甲酯繆勒管抑制物質;抗繆勒管
棲葡萄青霉 4--7-甲基噻吩并[3,2-D]嘧啶膜聯蛋白-A1
沙福芽胞桿 4-環戊酮-1,2-二甲酸膜聯蛋白-A2
東方伊薩酵母 3--4-氟苯肼鹽酸鹽末端補體復合物C5b-9
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