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| 貨號 | FS-X9742 |
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中文名稱：JC-10熒光探針
英文名稱：JC-10
產品規格：1mg|5mg
貨號：FS-X9742
產品介紹:
JC-10是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時，JC-10聚集在線粒體的基質中，形成聚合物，可以產生紅色熒光；在線粒體膜電位較低時，JC-10不能聚集在線粒體的基質中，此時JC-10為單體，可以產生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。激發波長Ex510nm，發射波長Em525nm。 線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降，同時也可以用JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。JC-10單體的大激發波長為515nm，大發射波長為529nm；JC-10聚合物的大激發波長為585nm，大發射波長為590nm。實際觀察時，使用常規的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。 儲存條件：-20℃干燥避光保存，保質期12個月。 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
糖蛋白130(gp130/CD130)英文名：gp130/CD130 蛇巴曲抗體包裝5g
瘦受體(Leptin receptor)英文名：Leptin receptor BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體包裝100ml
瘦受體(LEPR)英文名：LEPR Bax抗體包裝25ml
瘦(LEP/Leptin)英文名：LEP/Leptin Bcl-2抗體包裝500ml
噬性細胞趨化因子(Eotaxin)英文名：Eotaxin 腦源神經營養因子抗體包裝1g
嗜性粒細胞趨化因子(Eotaxin)英文名：Eotaxin 堿性成纖維生長因子抗體包裝250mg
生長調節致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)英文名：GROα/CXCL1/MGSA 癌轉移抑制基因1抗體包裝100ml
生長分化因子15(GDF-15)英文名：GDF-15 牛血清白蛋白抗體包裝25ml
神經趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)英文名：fractalkine/CX3CL1 β-酪蛋白抗體包裝5ml
凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)英文名：LOX-1 β葡聚糖受體抗體包裝100g
苗條受體(Leptin receptor)英文名：Leptin receptor 蛇蛋白巴曲抗體包裝500g
苗條(OB)英文名：OB 非受體性蛋白酪激ETK抗體包裝25mg
苗條(LEP)英文名：LEP 磷化非受體性蛋白酪激ETK抗體包裝25g
粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)英文名：GMCSF/CSF2 磷化相關死亡促進因子抗體包裝5g
可溶性E選擇(sE-selectin)英文名：sE-selectin BarX1蛋白抗體包裝100g
染色體脆弱性相關基因抗體干擾α4(IFNα4)Epirubicin hydrochloride (4'-Epidoxorubicin hydrochloride) 是阿霉的半合成的 L-阿拉伯糖衍生物，能
JC-10熒光探針阪崎腸桿 D-(+)-二苯甲酰囊蟲病抗體
黑曲霉 米那普侖鹽酸鹽腦啡肽
環狀芽孢桿 富馬酸鈉腦鈉;腦鈉尿肽
Rhizobium multihospitium 酸三環癸烯酯內
釀酒酵母 (R)-1-N-Boc-2-甲基哌內核心抗體
附著孢小隔指孢 3-溴-5-苯甲腺來源的血管內皮生長因子
綠菇 2,4-二-6-苯基-1,3,5-三內皮
雙孢蘑菇 2-氟-3-羥基吡啶內皮1
假單胞 2,2'-二烯基雙酚A內皮2
嗜中溫寒冷桿 5-乙氧基-3-甲內皮特異性分子
焦曲霉 3-[(N-Boc-N-甲氨基)甲基]內皮型一氧化氮合
綠色木霉 2-(N-Cbz)-3-(N-Boc)-2,3-二氨基酸內皮抑
枯草芽孢桿枯草亞種 2--1,3-二甲氧基苯內皮脂肪
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum 氟鋯酸銨內消旋肌單核苷酸脫氫
枯草芽孢桿枯草亞種 7-硝基喹唑啉-2,內源性
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