13524666654
當前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞組織染色>> 巴氏染色試劑盒(EA65)
| 貨號 | FS-X9853 |
|---|
中文名稱：巴氏染色試劑盒(EA65)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：400ml
貨號：FS-X9853
產(chǎn)品介紹:
細胞中的細胞核是由酸性物質(zhì)組成，它與堿性染料的親和力較強；而細胞漿則相反，它含有堿性物質(zhì)和酸性染料的親和力較大。巴氏染色液利用這一特性對細胞進行多色性染色，細胞經(jīng)染色后能清晰地顯示細胞的結(jié)構(gòu)，胞質(zhì)透亮鮮麗，各種顆粒分明，細胞核染色質(zhì)非常清楚，從而較容易發(fā)現(xiàn)異常細胞。通過巴氏染色可反映出細胞在炎癥刺激下和癌變后的形態(tài)學(xué)變化，對早期發(fā)現(xiàn)和診斷一些病變和腫瘤具有較重要意義。 巴氏染色法是臨床細胞學(xué)檢查常用的傳統(tǒng)染色方法，在婦科檢查中，巴氏染色細胞學(xué)檢查是宮頸癌及癌前病變的較常用篩查方法。同時巴氏染色還可觀察女性激素水平和檢測生殖道病原體如念珠菌、滴蟲等的感染。其中EA50染液為EA36的改良型，其操作方法與EA36相同。一般認為，EA36和EA50較適用于婦科標本，改良EA65染液較常用于非婦科標本(如胸、腹水等脫落細胞)。 儲存條件：室溫密封保存。 有效期：六個月。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Carisoprodol（標準品）英文名： Streptozocin柯薩奇病A16型聚合3D包裝25g
Carmustine(標準品)英文名： Sulconazle Nitrate睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體包裝5g
Carvedilol（標準品）英文名： Sulconazle Nitrate角蛋白16抗體包裝1g
Chlormadinone Acetate（標準品）英文名： Sunitinib base4號染色體開放閱讀框17抗體包裝25g
Ciclesonide(標準品)英文名： Sunitinib base質(zhì)脆性X智力低下蛋白結(jié)合蛋白2抗體包裝100mg
Cilostazol（標準品）英文名： Sunitinib Malate胸腺基質(zhì)淋巴生成受體抗體包裝25mg
Citalopram HBr（標準品）英文名： Sunitinib Malate角蛋白12抗體包裝100g
Corticosterone(標準品)英文名： Suprofen谷半胱γ合成抗體包裝25g
Cortisone acetate(標準品)英文名： Tacrolimus /FK506 monohydrate表面趨化因子受體3抗體包裝500g
Cortisone(標準品)英文名： Tacrolimus /FK506 monohydrate補體C2抗體包裝25g
Cyclophosphamide（標準品）英文名： Tamoxifen Citrate 造血干抗原CD133抗體包裝1g
Cyclosporin A（標準品）英文名： Tamoxifen Citrate 內(nèi)受體抗體包裝5g
Cyproterone acetate(標準品)英文名： TandutinibCD20抗體包裝1g
Cytarabine（標準品）英文名： TandutinibCD24抗體包裝1g
D(+)-阿拉伯糖(標準品)英文名： Teicoplanin 白介2受體a鏈/IL-2RA抗體包裝250mg
易變?nèi)墙湍?/span>Trigonopsis│variabilis 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR血吸蟲抗原關(guān)附;Guan-fu base A
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,用于培養(yǎng),藥劑造模血吸蟲抗體試劑盒旋復(fù)花內(nèi)酯;Britannilacton
赤桿菌Erythrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品血吸蟲抗體試劑盒8-香葉草氧基補骨脂;8-Gerany
巴氏染色試劑盒(EA65)大腸埃希 [(苯硫基)亞甲基]雙(三環(huán)己基膦)二化釕衣原體IgM抗體
Deinococcus 2,4-二-5-氟苯甲支原體IgM抗體
哈茨木霉 2-基-4-甲氧基苯甲細粒棘球絳蟲糞抗原
淡紫擬青霉 6-氨基-1-甲叔丁酯抗狂犬病抗體
鐮刀 1-BOC-6-氨基引唑乙酰
發(fā)酵乳桿 5-溴-3-吡-2-共濟失調(diào)蛋白3
球毛殼 3,4,5-三溴苯異連蛋白結(jié)合蛋白1
乳桿屬 鹽羥N-乙酰--D-氨基葡萄糖
黃色籃狀 3-溴苯酮白蛋白加合物
果生鏈核盤 1-苯基辛烷異常凝血原
浸麻類芽胞桿 4-叔丁基-2-苯乙酮D蛋白
草青霉 6-溴-2,3,4,9-四氫-1H-咔唑羧肽
黃曲霉 5-甲氧基啉抗抗體
釀酒酵母 2,6-吡啶二羧單乙酯脯羥化1
腸桿 2-甲巰基-4-氨基嘧啶脯羥化2
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責，儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
儀表網(wǎng)