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瑞氏-姬姆薩染色液

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 16:10:24瀏覽次數:166次

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貨號 FS-X9854
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產品介紹:

產品簡介:

瑞氏-姬姆薩染色液主要應用于血液和骨髓涂片染色。細胞的著色過程是染料透入被染物并存留其內部的一種過程,此過程既有物理吸附作用,又有化學親和作用。各種細胞及細胞的各種成分由于其化學性質不同,對瑞氏-姬姆薩染色液中的酸性染料(曙紅)和堿性染料的親和力也不一樣。因此,標本涂片經瑞氏-姬姆薩染色液染色后,相應各類細胞呈現不同的著色,從而達到辨別其形態特征的目的。

瑞氏-姬姆薩染色液是采用優質試劑原料和經典配方配制,主要用于血液和骨髓涂片,細菌等染色。

儲存條件:室溫密封保存。

有效期:一年。

中文名稱:瑞氏-姬姆薩染色液

英文名稱:

產品規格:200ml

貨號:FS-X9854

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

D-半乳糖(標準品)英文名: TeniposideB和T淋巴衰減蛋白抗體包裝5g

D-(標準品)英文名: TeniposideCD4抗體包裝150

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D-絲(標準品)英文名: Terbinafine HClL選擇抗體包裝25g

Deoxycorticosterone acetate...英文名: Terbinafine HClCD68抗體包裝5g

Dexamethasone Acetate(標準品)英文名: Teriparatide acetate/Human PTH(1-34)6號染色體開放閱讀框226抗體包裝100g

Dexamethasone Sodium Phosph...英文名: Terlipressin Acetate間隙連接蛋白30抗體包裝25g

Dexamethasone(標準品)英文名: Thiamphenicol2號染色體開放閱讀框69抗體包裝25g

Diethylstilbestrol(標準品)英文名: Thiamphenicol3號染色體開放閱讀框18抗體包裝5g

DL-精(標準品)英文名: Thymopentin Acetate巨噬炎癥因子1β /MIP-1β抗體包裝1g

Donepezil HCl type III(標準品)英文名: Tiagabine HCl外基質金屬蛋白誘導因子抗體包裝5g

結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規格:>98.5%,BR,可用于培養血吸蟲試劑盒熊果乙酯;Acetylursolic

威尼斯不動桿菌Acinetobacter│venetianus 質量規格:≥675 U/mg,USP28血栓B2試劑盒細辛;2,4,5-Trimethoxy

大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:含量測定血栓A2合成試劑盒香葉;Geraniol
瑞氏-姬姆薩染色液鏈格孢 2-巰基-6-甲氧基苯并噻唑脯羥化3

橙色桿孢囊 環己基乙烯基CD9分子

大腸桿 丁吡尿香草扁桃

長枝木霉 烯基-1,3-磺內酯Wnt-5a蛋白

馬來西亞鏈霉 氮雜環丁烷-3-叔丁酯鹽鹽蛋白質賴甲基轉移

平菇 1-甲基胍鹽鹽蛋白精甲基轉移1

產氣莢膜梭 C型 3-氟-5-酚二甲基精二水解1

微桿 (S)-3-叔丁氧羰基氨基二甲基精二水解2

納西桿 6-(三氟甲基)吡啶-3-二甲基精二水解1

赤褐鵝膏 6-苯基-3-噠酮二甲基精二水解2

大腸埃希氏桿 2-氨基-5-叔丁基噻吩-3-甲甲酯中性粒趨化因子

玫瑰色考克氏 2-氨基嘧啶-4-羧甲狀旁腺

平菇(黑平1號) 4-(4-甲基-1-哌)芐α7煙堿型乙酰受體

褐囊蜜環 3-硝基-2-羧基甲酯腐

乙酰微小桿 環甲酰酮解脲脲原體

 


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