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| 貨號 | FS-X9858 |
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中文名稱：細胞膜染色試劑盒(紅色熒光)-M02
英文名稱：
產品規格：1000T|5000T
貨號：FS-X9858
產品介紹:
M02細胞膜染色試劑盒是利用M 系列探針進行溶酶體特異性染色的試劑盒。本試劑盒中的M02細胞膜染色探針為紅色熒光標記的細胞膜探針，具有644/663nm的大激發/發射波長。 M系列探針是對活細胞的細胞膜進行選擇性染色的一類熒光染料，該系列探針可以選擇性標記細胞膜。當親脂性的紅色熒光探針M02 進入細胞膜后，在整個細胞膜上擴散，佳濃度時可以使整個細胞膜染色。染色液M02在進入細胞膜之前熒光非常弱，當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強，被激發后可以發出紅色的熒光，具有很高的淬滅常數和激發態壽命。 熒光探針M02通常不會明顯影響細胞的活力，因此被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。除了簡單的細胞膜熒光標記外，還可以用于檢測細胞的融合和粘附，檢測發育或移植過程中細胞遷移，通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散，檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。 M系列細胞膜探針具有多種顏色可以選擇，可根據情況對樣品進行多色標記實驗。除了本試劑盒的紅色熒光探針，我公司還可以提供綠色、橙色、深紅色等顏色的染色試劑盒。 儲存條件：染料-20℃避光保存；避免反復凍融；稀釋液2-8℃保存。 有效期：六個月。 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
L-腎上腺(標準品)英文名： Sumatriptan succinate 耐藥相關蛋白9抗體包裝5g
L-絲(標準品)英文名： Streptomycin Sulphate22號染色體開放閱讀框40抗體包裝1g
L-天門冬(標準品)英文名： Streptomycin Sulphate嗜粒趨化蛋白3抗體包裝1g
L-巖藻糖(標準品)英文名： Dihydrostreptomycin Sulphate21號染色體開放閱讀框33抗體包裝250mg
L-異亮（標準品）英文名： Diclofenac sodium角蛋白15抗體包裝5ml
Lenalidomide（標準品）英文名： Diclofenac sodium角蛋白14抗體包裝1g
Letrozole（標準品）英文名： Gabapentin神經NB3特定蛋白抗體包裝1g
Levonorgestrel（標準品）英文名： Gabapentin促胃泌受體抗體包裝5g
Loperamide HCl(標準品)英文名： Domperidone單克抗體包裝1g
Losartan Potassium英文名： Domperidone2號染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
m-酚-4-磺(聚酚磺雜質)（標準品）英文名： Niclosamide間粘附分子3抗體包裝1g
m-酚-4，6-二磺 （聚酚磺雜質）（標準品...英文名： Niclosamide染色質結合蛋白Cbx8抗體包裝1g
m-酚-6-磺(聚酚磺雜質)（標準品）英文名： Ciprofloxacin降鈣抗體包裝25g
MB1120-S英文名： Ciprofloxacin降鈣基因相關肽1型受體抗體包裝5g
Medroxyprogesterone acetate...英文名： FamciclovirCD19抗體包裝500mg
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格：>98.5%血漿激肽釋放試劑盒L-纈;L-Valine
: JCM13471資源名稱: DSMZ17855, Type strain 質量規格：HPLC>98%,標準品血漿α顆粒膜蛋白試劑盒香草;4-hydroxy-3-meth
彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質量規格：>98.5%,BR血紅氧合2試劑盒雪松;Cedrol
細胞膜染色試劑盒(紅色熒光)-M02釀酒酵母 1-N-BOC-4-乙酰基尿激肽原1
糙皮側耳 2,4,6-三氟異硫苯酯彈性蛋白
佐久氏沙雷氏 3-苯氧基苯甲酰肼DNA甲基化轉移3A
總狀毛霉 1-丁基-3-氟苯DNA甲基化轉移3B
釀酒酵母 反式-2-三氟甲基肉桂副流感病
稻黑孢霉 (二甲基氨基)二甲基(2,3,4,5,6-五氟苯氧基)亞六氟磷鹽抗磷脂酰絲抗體
缺陷短波單胞 3-吡啶-2-甲核外切1
無 5--2-苯并噻唑啉酮核外切1
靈芝(紅芝，赤芝)（可訂購） 2-羥基-3-基吡啶耳石蛋白1
孟氏假單胞 2-氟-4-橋粒芯蛋白3IgG
孢吸水鏈霉 5-溴-2--4-(苯氧基)-嘧啶蛋白精脫亞氨4
白井盤多毛孢 3-基-5-硝基三氟甲苯瓜化抗凝血
凝結芽胞桿 Fmoc-D-3-基苯c-fos
金產色鏈霉 Fmoc-L-3-基苯色C
蟲草屬 Fmoc-D-2-苯可溶性內皮生長因子
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