13524666654
當前位置：上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> MTT細胞增殖檢測試劑盒
| 貨號 | FS-X9744 |
|---|
產品介紹:
儲存條件：冷藏（2-8℃）避光 概述 MTT細胞增殖檢測試劑盒（MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）被廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性檢測。MTT可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物Formazan，在特定溶劑存在的情況下，可以被*溶解，然后通過酶標儀可以測定570nm波長附近的吸光度。 應用 細胞增殖與毒性檢測 Component A:MTT;Component B:MTT Solvent;Component C:Formazan Solubilization Solution |
中文名稱：MTT細胞增殖檢測試劑盒
英文名稱：MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
產品規格：250次|500次
貨號：FS-X9744
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
二肽基肽-4(DPP4)英文名：DPP4 EBV立即早期基因BRLF1抗體包裝1g
二肽基肽4(DPP4)英文名：DPP4 腦表達X連鎖蛋白4抗體包裝1g
二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)英文名：SLC/CCL21 B淋巴新型蛋白1抗體包裝5g
凋亡相關因子(Fas/Apo-1/CD95)英文名：Fas/Apo-1/CD95 核突觸蛋白β抗體包裝1g
凋亡相關因子(FAS)英文名：FAS BTRC2蛋白抗體包裝5g
單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)英文名：MCP-1/CCL2/MCAF BEND3蛋白抗體包裝1g
次級淋巴組織趨化因子6Ckine(CCL21)英文名：CCL21 BEND4蛋白抗體包裝25g
層粘連蛋白(LN)英文名：LN BEND6蛋白抗體包裝5g
層粘連蛋白(Laminin)英文名：Laminin 胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體包裝100MG
層連蛋白(Laminin)英文名：Laminin 巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白2抗體包裝25g
半乳糖凝集3(Galectin-3)英文名：Galectin-3 巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白5抗體包裝5g
半乳糖凝集3(Galectin3)英文名：Galectin3 巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白4抗體包裝25MG
半乳糖凝集1(Galectin-1)英文名：Galectin-1 巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白7抗體包裝250g
半乳凝3(GAL-3)英文名：GAL-3 巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白9抗體包裝50g
半乳凝3(GAL3)英文名：GAL3 巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白10抗體包裝1g
銅轉運蛋白質β鏈抗體干擾α21(IFNα21)L (GW572016) 是一種 ErbB-2 和 EGFR 酪激結構域的有效抑制劑，對純化的 EGFR 和 ErbB-2 的 IC50
MTT細胞增殖檢測試劑盒釀酒酵母 N-芐氧羰基-4-氨基環己尿激
香菇 (芐氧羰基亞甲基)三苯基膦尿激型纖溶原激活物
異常威克漢姆酵母 3-溴芐脒鹽酸鹽尿激型纖溶原激活物受體
產色鏈霉 鹽酸奧寧尿羥脯
地中海擬無枝酸 α-甲基-尿氮
柔薄迷孔 乙酸香茅酯尿酸
齒被栓 氟立班絲氨尿調蛋白
出芽短梗霉 2-氨基-4-溴-5-尿微量白蛋白
枯草芽孢桿 (2E)-3-(6-氨基-3-吡啶基)-2-烯酸檸檬酸合
小孢根霉塊狀變種 瑞替加濱凝聚
中慢生華癸根瘤 N-乙酰-D-酸凝溶膠蛋白
鈉線屬 4,6-二-5-(2-甲氧基苯氧基)-2,2-二嘧啶凝血
產氨短桿 (R)-3-甲酸乙酯-L-鹽凝血抗凝血復合物
弗吉尼亞鏈霉 N-[6--5-(2-甲氧基苯氧基)[2,2'-二嘧啶]-4-基]-4-叔丁基苯磺酰凝血原
pLKO.1-puro 4-溴-2-基噻唑凝血原片段F1+2
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供，信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責，儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規避購買風險，建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。
儀表網