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貨號 | FS-X10208 |
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中文名稱:紅色標本保色液Ⅰ
英文名稱:
產品規格:500ml
貨號:FS-X10208
產品介紹:
注意事項: 由、甘油等組成。在制作保色浸制標本后,瓶口要用石蠟或者凡士林密封嚴實,并避免陽光直射。 儲存條件:室溫,12個月 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
細枝孢甘脫羧P蛋白抗體Human THRSP 大鼠膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫試劑盒
耐輻射奇球菌核孔蛋白GLE1抗體Human SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) 大鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管激(AMH)免疫試劑盒
交替紅色桿菌屬腎小球上皮蛋白1抗體Human THTPA 大鼠免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒
柱孢菌屬轉錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4抗體Human THUMPD3 大鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
小棱盤菌麥角蛋白抗體Human TICAM2 大鼠免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌膠質瘤發病相關蛋白1抗體Human TIGD5 大鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒
溶淀粉類芽孢桿菌糖基轉移25結構域1/前膠原半乳糖基轉移1抗體Human THUMPD1 大鼠絡(TYR)免疫試劑盒
油菜菌核病菌谷酰酰水解抗體Human TIGD1 大鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒
乳白耙菌糖基轉移25結構域2/前膠原半乳糖基轉移2抗體Human TIMELESS(Protein timeless homolog) 大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒
大腸埃希菌糖基轉移28家族1抗體Human THOC7 大鼠卵泡抑(FS)免疫試劑盒
東方伊薩酵母糖基轉移6結構1抗體Human TIMM10 大鼠膽固酰基轉移(LCAT)免疫試劑盒
貝酵母膠質瘤抑癌候選基因2抗體Human THOC6 大鼠硫氧還蛋白還原(TrxR)免疫試劑盒
黑曲霉磷化糖皮質激受體抗體Human THRAP3 大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)免疫試劑盒
香菇葡萄糖轉運蛋白6抗體Human Thrombospondin 3 大鼠硫乙酰肝蛋白多糖2(HSPG2)免疫試劑盒
明尼蘇達被毛孢糖皮質激受體β抗體Human SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) 大鼠硫類肝(HS)免疫試劑盒
武夷小單孢菌胰島葡萄糖6磷2抗體Human TINP1 大鼠流行性乙型腦炎(JE)抗體(IgG)免疫試劑盒
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質量規格:分析標準品,≥99.0% (GC)芳樟
施氏微桿菌Microbacterium│schleiferi 質量規格:柱層析用蓮心堿
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:柱層析用,200-400目蓮心堿高鹽
紅色標本保色液Ⅰ枯草芽胞桿 2-氨基十六烷環磷腺
多毛孢 3,5-二溴三氟甲苯磷脂
豇豆慢生根瘤 2,3-二苯甲酰干擾誘導蛋白1
香菇(L087) 3-溴三氟甲苯白三烯
Marisediminicola 2-溴-5-氟三氟甲苯顆粒蛋白前體
蘇云金芽孢桿松蠋亞種 3-溴-2-白介38
產克雷伯氏 溴乙酯巨噬炎性蛋白
玉蜀黍赤霉 2-甲基巰基-4-氨基嘧啶-5-甲乙酯甘油一酯
螺卷毛殼(只確定屬) 3-基-1,2-抗甲狀腺過氧化物抗體
松口蘑 芴甲氧羰基-L-高精膽
谷棒桿 2-氨基-1,3,4-噻二唑短鏈脂肪
秦氏蜜環 2-溴-1,4-二氟苯Klotho蛋白
枯草芽孢桿 4-氨基苯甲脒鹽鹽3β羥基類固脫氫
黑曲霉 2'-氟乙酰苯17β羥基類固脫氫
栗酒裂殖酵母 磷氫二P450側鏈裂解
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