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貨號 | FS-X9916 |
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產品介紹:
用途: 陰道細胞學涂片快速測定雌激素水平 注意事項: 能較好區分鱗狀上皮細胞的嗜酸性細胞質和嗜堿性細胞質。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
中文名稱:Rakoff染色液
英文名稱:
產品規格:100ml|500ml
貨號:FS-X9916
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
短裙竹蓀3-3ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體Human HSD17B2 小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒
紡錘形擬酵母精加壓受體2抗體Human HSD17B4 小鼠骨成型蛋白9(BMP-9)免疫試劑盒
蒂莫內馬賽菌凋亡相關斑點樣蛋白ASC抗體Human HSD17B6 小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒
蘋果鏈格孢絲狀肌動蛋白結合蛋白抗體Human HIST2H2AA4 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒
長雙歧桿菌抗凝血3抗體Human HMCN1 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒
發酵假絲酵母人血清白蛋白單克抗體Human Histone-H3 小鼠骨成型蛋白15(BMP-15)免疫試劑盒
牡丹葡萄孢載脂蛋白A4抗體Human HIST3H2A 小鼠骨保護(OPG)免疫試劑盒
黃色桿菌磷化Rho鳥交換因子2抗體Human HIGD1A 小鼠過氧化(GSH-Px)免疫試劑盒
百脈根中間根瘤菌磷化絲狀肌動蛋白結合蛋白抗體Human HIGD1B 小鼠谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)免疫試劑盒
天藍色鏈霉菌肌動蛋白相關蛋白2/3亞型1A抗體Human HIVEP1 小鼠谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒
支氣管敗血波氏菌錨蛋白重復結構域蛋白32抗體Human Hikeshi 小鼠谷脫氫(GDH/GLDH)免疫試劑盒
糞產堿菌糞亞種共濟失調7樣蛋白3B抗體Human HERC4 小鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒
平菇(科大雜優)感染性蛋白蛋白1抗體Human HEPACAM 小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族5抗體Human HIGD1B 小鼠睪(T)免疫試劑盒
污泥根瘤菌植物生長激ABP1抗體Human HEPACAM 小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌磷化活化復制因子2抗體Human Hikeshi 小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒
黃曲霉Aspergillus│flavus 質量規格:>98%,BCκB抑制蛋白激試劑盒山椒子烯
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質量規格:>98%,BCγ谷酰轉移試劑盒1,3,5,8-四羥基山
肉灰色鏈霉菌Streptomyces│griseocarneus 質量規格:>98%,BCγ-谷酰環化轉移試劑盒四氫姜黃
Rakoff染色液念珠狀諾卡氏 鹽羅沙替丁醋酯(93793-83-0)類風濕因子IgA抗體
黃暗色鏈霉 1-甲基-4-類風濕因子IgG抗體
解淀粉芽孢桿 D-(-)-扁桃乙酯布魯東氏酪激
球孢白僵 2--4-溴-5-氟甲苯肺炎衣原體IgG抗體
土曲霉金色變種 二硫化二異基黃原酯肺炎衣原體IgM抗體
黑根霉 肼抗髓鞘少突膠質糖蛋白抗體
燦爛類芽孢桿 3-溴-4-甲甲酯抗新蝶呤抗體
紡錘形賴芽孢桿 巴豆酰細粒棘球絳蟲糞IgG抗體
變異鏈霉 6-溴-2-氟吡啶細粒棘球絳蟲糞IGM抗體
腸沙門氏腸亞種 3-噻吩維生D結合蛋白1
大腸埃希氏桿 十二烷基溴化吡啶誘導骨髓白血病分化蛋白Mcl-1
醬油曲霉 4′-乙基苯乙酮肌骨
枯草芽孢桿 L-亮氨酰鹽鹽3-甲氧基去甲腎上腺
玉蜀黍赤霉 2,6-二氨基-4,5,6,7-四氫苯并噻唑3-甲氧基腎上腺
毛柄(金針菇) 4-苯酰甲基血小板內皮聚集受體 1
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