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噻唑藍MTT

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-09 13:44:18瀏覽次數:174次

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貨號 FS-X9675
噻唑藍MTT正在熱銷的產品:phospho-c-Abl(Tyr412) 化非受體酪氨激c-Abl抗體L-α-脂酰膽-β-花生四烯酰-γ-硬脂酰 10 mg/mL ,即1ml
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phospho-c-Abl(Th

產品介紹:

本品常用于生化研究中酶活力的測定,也可用于細胞增殖檢測。

號:298-93-1

分子式:C18H16N5SBr

分子量:414.3

純度:≥98%

性狀:黃色粉末

溶解性:溶于甲醇和DMSO,微溶于水

儲存條件:2~8℃避光

中文名稱:噻唑藍MTT

英文名稱:Thiazolyl blue tetrazolium bromid

產品規格:250mg|1g

貨號:FS-X9675

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

乙型肝炎e抗原(HBeAg)英文名:HBeAg ADCK1蛋白抗體包裝25g

乙型肝炎e抗體(HBeAb)英文名:HBeAb 酰基結合結構域蛋白4抗體包裝5g

乙酰(acetyl-CoA)英文名:acetyl-CoA α/β解4抗體包裝1g

乙酰轉移(CHAT)英文名:CHAT ADCK2蛋白抗體包裝250mg

乙酰酯(AchE)英文名:AchE 乙脫氫16家庭A1抗體包裝1g

乙酰受體抗體(AChRab)英文名:AChRab 粘附分子IgG樣結構域蛋白3抗體包裝1g

乙酰(ACH)英文名:ACH 乙脫氫1抗體包裝250mg

胰脂肪(PL)英文名:PL δ基乙酰脫抗體包裝1g

胰激肽原(PK)英文名:PK 肌側索硬化癥相關蛋白4抗體包裝500mg

胰高血糖樣肽2(GLP-2)英文名:GLP-2 α2巨球蛋白(α-2M)抗體包裝250mg

胰高血糖樣肽1(GLP-1)英文名:GLP-1 ACCSL蛋白抗體包裝500mg

胰高血糖(GC)英文名:GC 胎蛋白抗體包裝100mg

胰淀(Amylin)英文名:Amylin β淀粉樣前體蛋白結合蛋白3抗體包裝25g

胰島細胞抗體(ICA)英文名:ICA 星形肌動蛋白抗體包裝1g

胰島自身抗體(IAA)英文名:IAA 系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體包裝5g

激活受體2A抗體胱天蛋白14(P14)Selumetinib (AZD6244) is a potent, highly selective MEK1 inhibitor with IC50 of
噻唑藍MTT茶樹菇 歐前胡B類清道夫受體1

圍小叢殼 白樺脂酸B-趨化因子1

乳桿屬 白樺脂B活化因子

假單胞屬 酪B瘤-XL

栗疫 諾米林B瘤因子2

釀酒酵母 延胡索乙B瘤因子6

東方伊薩酵母 羅定C1q腫瘤壞死因子相關蛋白1

海蘇特氏 蘆竹堿Ca-ATP

節桿屬 番茄紅cAMP反應元件結合蛋白

葡萄座腔 順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯CC趨化因子受體1

枯草芽孢桿 他坦CC趨化因子受體2

鰻利斯頓氏 蘆薈大黃CC趨化因子受體5

尖鐮孢(尖孢鐮刀 )(可定) 平CD100分子

粒狀青霉 莨菪堿CD133分子

三孢布拉霉 氧化苦堿CD146分子

 


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