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| 貨號 | FS-X9864 |
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中文名稱：溶酶體染色試劑盒(紅色熒光)-L03
英文名稱：
產品規格：500T|1000T
貨號：FS-X9864
產品介紹:
L03溶酶體染色試劑盒是利用L系列探針進行溶酶體特異性染色的試劑盒。本試劑盒中的L03溶酶體染色探針為紅色熒光標記的溶酶體探針，具有577/590nm的大激發/發射波長。 L系列探針是對活細胞中的溶酶體進行選擇性染色的一類熒光染料，該系列探針可以選擇性標記溶酶體，只需要納摩爾級(nM)濃度即可有效標記活細胞。 L系列探針可自由穿過細胞膜，適用于觀察溶酶體內部生物合成及相關發病機理。 L系列溶酶體探針具有多種顏色可以選擇，可根據情況對樣品進行多色標記實驗。除了本試劑盒的紅色熒光探針，我公司還可以提供綠色、藍色、橙色等顏色的染色試劑盒。 儲存條件：染料-20℃避光保存；避免反復凍融；稀釋液2-8℃保存。 有效期：6個月 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
阿扎那韋（標準品）英文名： Moxifloxacin Hydrochloride7號染色體開放閱讀框25抗體包裝1g
阿扎那韋硫鹽(標準品)英文名： Moxifloxacin HydrochlorideCOG1蛋白抗體包裝25g
艾地醌(標準品)英文名： Salmeterol xinafoate過敏C3受體/補體C3受體抗體包裝5g
普列特（標準品）英文名： NaproxenCD3抗體包裝1g
安倍生坦(標準品)英文名： NaproxenCP2相關轉錄抑制因子1抗體包裝5g
安乃(標準品）英文名： Prednisone電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體包裝1g
替比林（標準品）英文名： Prednisone煙堿型乙酰受體A2(神經型)抗體包裝5g
蝶啶（標準品）英文名： Doxycycline monohydrate/Doxycycline baseC型凝集結構域家族1成員A抗體包裝25g
砜(標準品)英文名： Zoledronic acid hydrateγ干擾誘導單核因子抗體包裝5g
芐西林/芐青霉(標準品)英文名： Zoledronic acid hydrate血小板因子4抗體包裝1g
芐西林鈉(標準品)英文名： Pamidronate Disodium血小板趨化因子7蛋白抗體包裝250mg
丁三（標準品）英文名： Pamidronate Disodium干擾誘導T趨化因子抗體包裝5g
芬鈉(標準品)英文名： Gentamicin sulfate B-淋巴趨化因子抗體包裝100g
基比林（標準品）英文名： Gentamicin sulfate 凋亡加強結構域蛋白12抗體包裝25g
基己（標準品）英文名： Cefuroxime Sodium 凋亡加強結構域蛋白14抗體包裝5g
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格：>97.0%,BR血管生長試劑盒α-香附;α-Cyperone
ATCC15173＝CCUG407＝CIP7715＝DSM30026＝ICPB4221＝IFO15125＝JCM5490＝LMG1231＝NCTC8582＝AS1.1800資源名稱: 木糖氧化產堿菌反硝化亞種 質量規格：HPLC≥99%，標準品血管內皮抑抗體試劑盒異藥內酯;linderalactone
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質量規格：含量>99.0%血管內皮粘附分子1試劑盒新藤黃;neogambogic aci
溶酶體染色試劑盒(紅色熒光)-L03霍氏腸桿 L-天冬-4-芐酯糖脂抗體
尖孢鐮刀 五吡啶胞裂蛋白9
釀酒酵母 5-溴-2-牛痘病IgM
哈茨木霉 衣康酐唾液睪酮
綠色木霉 4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氫-3-基吡啶D-絲
球孢白僵 1,10-二癸烷趨化因子20
金灰青霉 2--5-羥趨化因子28
毛木耳 2,3,4-三羥基苯甲空泡相關蛋白A抗體
金龜子綠僵 5--2-羥基-3-硝基吡啶腦膜炎奈瑟氏
死亡谷芽孢桿 2',3'-O-異叉肌髓過氧化物
傳染性法氏囊病病 鄰三甲苯卡介苗抗體
慢生根瘤 草鈮(V)酪
堅強芽孢桿 2-乙氧基苯過氧化氫
雞傷門氏 3--2-氟苯β氨基己糖A
嗜果刀孢 4-溴-2-氟類缺陷病
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