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貨號 | FS-01S63545 |
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產品名稱:ACLATP檸檬酸裂解酶檢測試劑盒微量法
規格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63545
商品介紹:
測定意義 ACL(EC4.1.3.8)是脂肪酸合成中的關鍵酶,其催化產生的乙酰輔酶可用于脂肪酸合成和碳鏈延長、黃酮類物質合成、氨基酸合成等。 測定原理: ACL在ATP和輔酶存在的情況下催化檸檬酸裂解為乙酰輔酶、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸鹽。蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm測定NADH減少速率,計算ACL活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
雞脂蛋白脂(LPL)試劑盒Anti-ANAPC5 Antibody
雞胸腺(TP5)試劑盒 Anti-ANGPTL7 Antibody整合連接激-1
雞可溶性CD14分子(sCD14)試劑盒Anti-ANKRD20A3 Antibody芳香化(抗原)
雞胰島(INS)試劑盒Anti-ANGPTL7 Antibody肺表面活性蛋白C抗原
雞甲狀腺(T4)試劑盒Anti-ANKRD26 Antibody肥大類糜蛋白1
雞促紅生成(EPO)試劑盒Anti-ANKRD1 Antibody銅藍蛋白抗原
雞甘露糖受體C1(MRC1)試劑盒 Anti-ANKRD20A1 Antibody趨化樣蛋白
雞胰島樣生長因子2-mRNA結合蛋白3(IGF2BP3)試劑盒 Anti-ANKRD30A Antibody
雞T活化連接蛋白(LAT)試劑盒Anti-ANKRD30A Antibody凋亡關聯酪激抗原
雞激錨定蛋白1(AKAP1)試劑盒 Anti-ANO1 Antibody水通道蛋白-2(抗原)
雞腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TSGF)試劑盒Anti-ANO7 Antibody腺苷三磷結合盒轉運體A1抗原
雞胃動蛋白2(GKN2)試劑盒Anti-ANO9 Antibody組織因子途徑抑制劑
雞酮脫氫E1(PDH E1)試劑盒Anti-AOX1 Antibody葡萄糖轉運蛋白12
雞抗酰tRNA合成抗體(Anti-AlaRS/Anti-PL12)試劑盒 Anti-ANOS1 Antibody表皮生長因子受體III型突變體抗原
雞脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)試劑盒 Anti-AP2A1 AntibodyCD26抗原
ACLATP檸檬酸裂解酶檢測試劑盒微量法胰輔脂抗體Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA KitM H 肉湯(MHB) 用于敏感試驗
19號染色體開放閱讀框45抗體Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit氧化型Ⅱ
過氧化氫誘導轉錄蛋白1抗體Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit苦玄參苷IA Picfeltarraenin IA
核因子NFκB激活蛋白1抗體Human Hepc(Hepcidin) ELISA Kit柯諾辛 Corynoxine
第12號染色體開放閱讀框23抗體Human GSK3α(Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha) ELISA Kit人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒, SP-A ELISA kit
γ-連環/連接蛋白γ抗體Human GSP(Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit人肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒,SP-A ELISA kit
10號染色體開放閱讀框4抗體Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit人丙轉/谷丙轉(ALT/GPT)ELISA試劑盒, ALT/GPT ELISA kit
10號染色體開放閱讀框47抗體Human GPI(Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit人層連蛋白/板層(LN)ELISA試劑盒, LN ELISA kit
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