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FFA游離脂肪酸含量檢測試劑盒微量法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 15:45:48瀏覽次數:212次

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貨號 FS-01S63519
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產品名稱:FFA游離脂肪酸含量檢測試劑盒微量法

規格:100管/96樣

檢測方法:微量法

貨號:FS-01S63519
商品介紹:

測定意義

FFA既是脂肪水解的產物,又是脂肪合成的底物。FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內分泌功能有關,也可反映食物貯藏中的品質變化。

測定原理:

在弱酸性條件下,FFA與銅鹽反應生成銅皂,在715nm處有特征吸收峰,在一定范圍內游離脂肪酸含量與顯色程度呈線性關系。

自備儀器和用品:

研缽、臺式離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

可溶性轉鐵蛋白受體1(sTfR1)聯免疫試劑盒盤長孢狀盤孢Synaptotagmin-1 (D33B7) Rabbit mAb

白介12 p35(IL-12 p35)聯免疫試劑盒乳桿屬Phospholamban (D9W8M) Rabbit mAb

白介25(IL-25)聯免疫試劑盒根瘤Phospho-EGF Receptor (Tyr1068) (D7A5) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)

空泡相關蛋白A(VacA)聯免疫試劑盒耐寒短桿Phospho-cdc2 (Tyr15) (10A11) Rabbit mAb (PE Conjugate)

白介34(IL-34)聯免疫試劑盒齒梗孢霉CoREST (D6I2U) Rabbit mAb

松弛肽1(RLN1)聯免疫試劑盒 彩色豆馬勃RPL5 Antibody

松弛肽3(RLN3)聯免疫試劑盒 木蹄層孔Myeloperoxidase (E1E7I) XP® Rabbit mAb

酪激2(Tyk-2)聯免疫試劑盒 布拉克須霉Myeloperoxidase (E1E7I) XP® Rabbit mAb

酪羥化(TH)聯免疫試劑盒 白禿馬勃Puma (E1S7A) Rabbit mAb (Rodent Specific)

雷帕霉靶蛋白(mTOR)聯免疫試劑盒 孢籃狀B7-H4 (D1M8I) XP® Rabbit mAb

Persephin蛋白(PSPN)聯免疫試劑盒費希爾曲霉B7-H4 (D1M8I) XP® Rabbit mAb

轉化生長因子β誘導蛋白(TGFβI)聯免疫試劑盒大腸埃希Nav1.7 Antibody

轉化生長因子β激蛋白22(TSC22)聯免疫試劑盒大腸埃希Nucleolin (D4C7O) Rabbit mAb

白抗原A(HLA-A)聯免疫試劑盒 白酒  總、總酯、固形物 Toll-like Receptor 9 (D9M9H) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)

蛋白激C-η(PKCη)聯免疫試劑盒表皮葡萄球RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
FFA游離脂肪酸含量檢測試劑盒微量法野生型P53誘導基因1抗體Anti-MMP14 Antibody表面蛋白分離試劑盒8次規格

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