當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(FITC)
貨號 | FS-X9624 |
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產品介紹:
本試劑盒應用范圍廣,可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況,也可以檢測培養的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。 細胞在發生凋亡時,會激活一些DNA內切酶,這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發現180-200bp的DNA ladder。 TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)細胞凋亡檢測試劑盒(FITC)可以用來檢測組織細胞在凋亡晚期過程中細胞核DNA的斷裂情況。其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的作用下,在基因組DNA斷裂時暴露出的3′-羥基(3′-OH)末端摻入FITC-12-dUTP,從而可以用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。 本試劑盒對標記反應進行了優化,采用佳比例的FITC-12-dUTP和未標記dNTP進行3’-OH末端的核苷酸摻入,使得同一個斷裂的DNA片段末端可以形成更長的“標記尾巴"。該“標記尾巴"減少了相鄰摻入dNTP上標記基團的空間位阻,增加每個斷裂片段上的熒光基團數目,降低熒光基團相鄰后可能造成的聚集和淬滅,從而提高檢測靈敏度,減少非特異性反應。 試劑盒組份: 5×Equilibration Buffer————750μl FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl Recombinant TdT Enzyme—————20 μl Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl DNase I (1 U/μl)———————5μl 10×DNase I Buffer——————100 μl 儲存條件:-20℃,有效期一年。 |
產品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC) | 20T | FS-X9624 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
3-葡萄糖suan孕二chun(PdG)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PdG ELISA Kit,PdG,
二肽基肽meiIV(DPP4/CD26)elisa檢測試劑盒 英文名稱:DPP4/CD26 ELISA Kit,DPP4/CD26,
白細胞分化抗原CD40配體(CD40L/TNFSF5)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CD40L/TNFSF5 ELISA Kit,CD40L/TNFSF5,
組蛋白脫乙酰基mei2(HDAC2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:HDAC2 ELISA Kit,HDAC2,
轉膠蛋白(TAGLN)elisa檢測試劑盒 英文名稱:TAGLN ELISA Kit,TAGLN,
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)elisa檢測試劑盒 英文名稱:TRAIL ELISA Kit,TRAIL,
脂解激活脂蛋白受體(LSR)elisa檢測試劑盒 英文名稱:LSR ELISA Kit,LSR,
整合suα1(ITGα1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ITGα1 ELISA Kit,ITGα1,
早老su2(PS2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PS2 ELISA Kit,PS2,
單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MCP-4/CCL13 ELISA Kit,MCP-4/CCL13,
不透光相關蛋白(OPAs)elisa檢測試劑盒 英文名稱:OPAs ELISA Kit,OPAs,
雌三chun(E3)elisa檢測試劑盒 英文名稱:E3 ELISA Kit,E3,
表皮細胞活化肽因子(CAPF)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CAPF ELISA Kit,CAPF,
白細胞彈性蛋白mei(HLE)elisa檢測試劑盒 英文名稱:HLE ELISA Kit,HLE,
白介su1受體相關激mei1(IRAK1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:IRAK1 ELISA Kit,IRAK1,
κB抑制蛋白激mei(IKK)elisa檢測試劑盒 英文名稱:IKK ELISA Kit,IKK,
β防御su1(DEFB1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:DEFB1 ELISA Kit,DEFB1,
TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(FITC)羥可待tong標準品 規格:5 vials 英文名稱:
標準品 規格:200mg 英文名稱:Reserpine
硫利達嗪標準品 規格:200mg 英文名稱:Thioridazine
benjiasuan雌二chun標準品 規格:250mg 英文名稱:Estradiol Benzoate (AS)
表乳suan標準品 規格:200mg 英文名稱:Epilactose
相關物質B標準品 規格:20mg 英文名稱:
硝ben地平亞硝基ben吡啶同系物標準品 規格:25mg 英文名稱:
枸櫞suanlvmi芬標準品 規格:500mg 英文名稱:Clomiphene Citrate
沙利度an標準品 規格:200mg 英文名稱:Thalidomide
溴丙an太林標準品 規格:200mg 英文名稱:Propantheline Bromide
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