當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> Caspase 8熒光法檢測試劑盒(AFC)
貨號 | FS-X9575 |
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產品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
Caspase-8 Fluorescence Metric Assay | 20T|50T|100T | FS-X9575 |
產品介紹:
本試劑盒適用于培養細胞及新鮮組織Caspase-8 檢測。Caspase 家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中Caspase-8 為關鍵的執行分子,與DNA 斷裂、染色質凝聚和凋亡小體形成有關。Caspase-8 在正常狀態下以酶原的形式存在于胞漿中,沒有活性;但在細胞發生凋亡階段,它被激活,活化的Caspase-8 由兩個大亞基和兩個小亞基組成,裂解相應的胞漿胞核底物,終導致細胞凋亡。Caspase-8 熒光檢測試劑盒就是將Caspase-8 序列特異性的多肽偶聯至發色基團。當底物被Caspase-8 剪切后,發色基團即游離出來,可通過熒光酶標儀測定其熒光強度(激發波長=485nm,發射波長=535nm)。 注意事項 1. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用。 2. 對某些凋亡誘導劑引起的細胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-8 活化的機制,這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-8 活性無明顯改變,需要考慮凋亡機制中的其他信號通路。 3. 細胞數量需達到3~5×106 個或新鮮組織50~100mg,以便能達到測定需要的100~200μg 蛋白的要求,因為Caspase-8 的活性與細胞裂解液的蛋白含量有關,如測定的RFU 值偏低,可以通過適當延長反應的時間,如果值還是不高,可通過增加細胞數量或組織量的方法來提高蛋白量。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
突觸融合蛋白7(STX7)檢測試劑盒 forSyntaxin7(STX7)
維生suD3(VD3)檢測試劑盒 forVitaminD3(VD3)
β-骨膠原交聯(βCTx)檢測試劑盒 forBeta-Crosslaps(bCTx)
間隙連接蛋白43(CX43)檢測試劑盒 forConnexin43(CX43)
波形蛋白(VIM)檢測試劑盒 forVimentin(VIM)
彈性蛋白mei3A(ELA3A)檢測試劑盒 forElastase3A(ELA3A)
地塞mi松誘導蛋白(DEXI)檢測試劑盒 forDexamethasoneInducedProtein(DEXI)
嗜suan性粒細胞過氧化物mei(EPX)檢測試劑盒 forEosinophilPeroxidase(EPX)
微管蛋白α8(TUBα8)檢測試劑盒 forTubulinAlpha8(TUBa8)
肌球蛋白重鏈8(MYH8)檢測試劑盒 forMyosinHeavyChain8,SkeletalMuscle,Perinatal(MYH8)
小乳表皮粘蛋白(SBEM)檢測試劑盒 forSmallBreastEpithelialMucin(SBEM)
奇異不良su(DYSF)檢測試劑盒 forDysferlin(DYSF)
胰島su樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)檢測試劑盒 forInsulinLikeGrowthFactorBindingProtein3(IGFBP3)
硬纖毛蛋白(STRC)檢測試劑盒 forStereocilin(STRC)
核連蛋白1(NUCB1)檢測試劑盒 forNucleobindin1(NUCB1)
Toll樣受體9(TLR9)檢測試劑盒 forTollLikeReceptor9(TLR9)
生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒 forGrowthDifferentiationFactor15(GDF15)
Caspase 8熒光法檢測試劑盒(AFC)舒巴坦suan標準品 規格:250mg 英文名稱:
磺an嘧啶標準品 規格:200mg 英文名稱:Sulfadiazine
zuo尼沙an標準品 規格:200mg 英文名稱:Zonisamide
炔諾tong標準品 規格:200mg 英文名稱:Norethindrone
ben妥英相關物質B標準品 規格:50mg 英文名稱:
fu哌啶chun相關物質A標準品 規格:10mg 英文名稱:Haloperidol Related Compound A
維生suD3標準品 規格:30mg×5ampules 英文名稱:Cholecalciferol (Vitamin D3)
雙氫速甾chun標準品 規格:30mg×4amplues 英文名稱:Dihydrotachysterol
鹽suan雙環維林標準品 規格:125mg 英文名稱:Dicyclomine Hydrochloride
曲康zuo標準品 規格:200mg 英文名稱:Terconazole
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的*細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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