完美世界国际版下载,魔天记忘语小说,天下高月小说

貨號	FS-X9686

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

英文名稱：

產品規格：20T|50T|100T

貨號：FS-X9686

產品介紹:

線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時，JC-1聚集在線粒體的基質中，形成聚合物，488nm 激發時的大發射波長為590nm，可以產生紅色熒光，在流式圖上表現為FL1和FL2雙陽性；在線粒體膜電位較低時，JC-1不能聚集在線粒體的基質中，此時JC-1為單體，488nm 激發時大發射波長為527nm，可以產生綠色熒光，形成流式圖中所有細胞FL1均為陽性。凋亡細胞則大多為FL1 單陽性。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。

通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降，同時也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。

線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)可以快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化，可以用于早期的細胞凋亡檢測。試劑盒染料與其他的陽離子染料如DiOC6(3)和羅丹明123 相比，特異性更高，對線粒體膜電位變化的特異性高于質膜電位變化，對線粒體去極化檢測的檢測一致性更好；紅綠色熒光強度比率只受線粒體膜電位的變化，不受線粒體大小，形狀，密度的差異干擾；檢測靈敏度強，對細胞應激反應的微小異質性都能辨別；

儲存條件：JC-1-20℃避光保存，避免反復凍融。孵育緩沖液2-8℃保存。

有效期：一年。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

同型半胱(Hcy)英文名：Hcy 磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體包裝1g

鐵調(Hepc)英文名：Hepc 雙調蛋白（結腸直腸源性生長因子）抗體包裝250mg

鐵蛋白(Ferritin)英文名：Ferritin 磷化通道蛋白2抗體包裝100g

鐵蛋白(FE)英文名：FE 粘附相關激抗體包裝25g

天門冬基轉移(AST)英文名：AST 磷化粘附相關激抗體包裝5g

天冬基轉移(AST)英文名：AST 磷化蛋白激B抗體包裝1g

糖原磷化同工MM(GP-MM)英文名：GP-MM 磷化通道蛋白2抗體包裝5g

糖原磷化同工II(GP-II)英文名：GP-II 磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝1g

糖原磷化同工BB(GP-BB)英文名：GP-BB 磷化蛋白激B抗體包裝1g

糖原合成激(GSK)英文名：GSK 磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝5g

糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)英文名：CDT 磷化活化轉錄因子4抗體包裝1g

糖皮質類固受體(GR)英文名：GR 磷化雄激受體抗體包裝5g

糖皮質激受體β(GR-β)英文名：GR-β 磷化雄激受體抗體包裝5mg

糖皮質激受體α(GR-α)英文名：GR-α 磷化蛋白激AKT1,2,3抗體包裝1g

糖類抗原199(CA199)英文名：CA199 磷化蛋白激B抗體包裝1g

ANGEL1蛋白抗體胎蛋白(αFP)Ponatinib是一種有效的，可口服的多靶點激抑制劑，抑制Abl，PDGFRα，VEGFR2，FGFR1 和 Src 的 IC50 分別為0.37 nM，
JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒金龜子綠僵四苯基化鏻α;β干擾受體

牛型放線 2-氨基-4-代苯并噻唑α1抗胰蛋白

假桄榔葉點霉 3-氨基-3-(4-)酸α1酸性糖蛋白

厚壁芽孢桿 2-氟苯酸α1-微球蛋白

蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 4,4'-(2-甲基-6-乙基苯)α2-HS糖蛋白

哈茨木霉磺二甲基嘧啶鈉鹽α2巨球蛋白

釀酒酵母 1-溴-2-乙基苯α2抗纖溶

豌豆根瘤 2,4-二αL巖藻糖苷

斑玉蕈 2-溴苯基乙α-N-乙酰-半乳糖氨

地霉半乳糖酵母芐磺酰α-氨基羥甲基惡唑酸

粘著劍 1-溴-2，6-二苯α淀粉

Acinetobacter genospecies 2-氟-3-甲基-5-硝基吡啶α-防御

膠孢三(三溴新戊基)磷酸酯α-輔肌動蛋白4

紅球 D-(+)-二對甲氧基苯甲酰α甘露糖苷

松針散斑殼 2--5-α干擾
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)