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貨號 | FS-X10196 |
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產品介紹:
用途: 用于液體浸制真菌標本的制作。對于灰、白、淺黃或淡褐色真菌的保存推薦此液。 注意事項: 主要由硫酸鋅、福爾馬林等組成。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
中文名稱:真菌保存液Ⅲ
英文名稱:
產品規格:100ml
貨號:FS-X10196
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
瓜類鞘單胞菌胃泌抑制肽受體抗體Human TRIM24 大鼠糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌粒-巨噬集落激因子受體α抗體Human TRIM2 大鼠糖皮質類固受體(GR)免疫試劑盒
假單胞菌屬硫轉移pi基因抗體Human TRAT1 大鼠糖類抗原199(CA199)免疫試劑盒
氏假單胞菌接頭蛋白Gab 2抗體Human TRAV20 大鼠糖類抗原125(CA125)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌葡萄糖6磷α/G6Pase-α抗體Human TRIM23 大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌糖磷脂酰肌抗體Human SRSF2(Serine/arginine-rich splicing factor 2) 大鼠糖蛋白130(gp130)免疫試劑盒
球孢鏈霉菌黃色變種乙二1抗體Human TRBV5-4 大鼠碳酐2(CA-2)免疫試劑盒
棒曲霉核呼吸因子2抗體Human DCT(L-dopachrome tautomerase) 大鼠碳酐(CA)免疫試劑盒
類干酪乳桿菌腫瘤轉移抑制基因GDIA1抗體Human TREML4 大鼠胎盤生長因子(PLGF)免疫試劑盒
長雙歧桿菌腫瘤轉移抑制基因GDIA2抗體Human TRAP1 大鼠羧甲基賴(CML)免疫試劑盒
普通層褶菌胰高血糖抗體Human TRAPA/SSR1 大鼠羧化不全骨鈣(ucOC)免疫試劑盒
香菇線粒體甘油3磷酰基轉移抗體Human TRAT1 大鼠髓樣觸發性受體2(TREM2)免疫試劑盒
橄欖色毛殼磷脂酰基蛋白聚糖-6抗體Human TRAV20 大鼠髓系觸發受體-1(TREM-1)免疫試劑盒
抗性微桿菌磷二羥酰基轉移抗體Human SRSF2(Serine/arginine-rich splicing factor 2) 大鼠髓鞘相關糖蛋白(MAG)免疫試劑盒
粉褶環柄菇囊性組織液體蛋白15抗體Human TRBV5-4 大鼠髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化接頭蛋白Gab2抗體Human TRAP1 大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒
真菌保存液Ⅲ異常漢遜酵母異常變種 2,3-二基乙酯腺脫氨
白金針14 4-甲氧基鹽鹽消退D1
異常漢遜酵母 2--5-基異酯硝基酪
相思根瘤 5-硝基噻吩-3-羧小膠質特異性標志物
蘇云金芽胞桿 4-咪唑心肌肌鈣蛋白Ⅰ
雞傷門氏 4'-氟-2-羥基苯乙酮心肌特異性肌鈣蛋白T
腐皮殼 B-2-二苯并呋喃基心鈉
棉子糖乳球 1-溴乙基乙酯鋅-α2糖蛋白
產克雷伯氏 三(2-烯酰氧乙基)異脲酯(含穩定劑吩噻)鋅原卟啉
紫色紅曲 3--4-硝基三氟甲苯新飽食分子蛋白1
玉黑粉 2-甲基-4-羧基吡啶信號傳導子及轉錄激活子6
釀酒酵母 四氫吡喃-4-甲酰信號3A
鐮刀屬 五氟化(4-苯基)硫信號轉導分子7
枯草芽孢桿 5-乙酰基-2-羥基苯甲酰性結合球蛋白
杏鮑菇 2,4-二-5-異氧基苯肼胸腺基質生成
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