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| 貨號 | FS-X9872 |
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產品介紹:
E42細胞膜完整性檢測試劑盒是利用E系列探針進行細胞染色的試劑盒。本試劑盒中的E42 細胞染色探針為紅色熒光標記的細胞探針，具有550/683nm 的大激發/發射波長。 E42探針是對細胞膜損傷細胞進行染色的試劑，不能穿透正常細胞膜，只有當細胞膜完整性受到影響時才可以染色細胞，進入細胞后會與細胞內蛋白質緊密結合，可有效標記膜不完整細胞。 儲存條件：染料-20℃避光保存；避免反復凍融；稀釋液2-8℃保存。 有效期：一年。 |
中文名稱：細胞膜完整性檢測試劑盒
英文名稱：
產品規格：500T
貨號：FS-X9872
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
醋唑（標準品）英文名： Lamotrigine軟骨性蛋白1抗體包裝500g
醋芬（標準品）英文名： D-Galacturonic acid富含半胱蛋白結合蛋白抗體包裝25g
醋磺米(標準品)英文名： D-Galacturonic acidCREB調節轉錄激活因子3抗體包裝5g
醋萘氫（標準品）英文名： Calcitriol軟骨相關蛋白CRTAP抗體包裝250g
醋己定（標準品）英文名： Candesartan cilexetil1號染色體開放閱讀框100抗體包裝50g
醋麥迪霉（標準品）英文名： Candesartan cilexetil1號染色體開放閱讀框104抗體包裝1g
醋曲安（標準品）英文名： Canertinib1號染色體開放閱讀框112抗體包裝5g
達卡巴(標準品)英文名： 2-Guanidinoethylmercaptosuccinic Acid 1號染色體開放閱讀框113抗體包裝1g
達沙替（無）（標準品）英文名： Carbetapentane citrate/Pentoxyverine citrate1號染色體開放閱讀框114抗體包裝25g
達托霉(標準品)英文名： Carprofen1號染色體開放閱讀框109抗體包裝5g
大觀霉（標準品）英文名： CarprofenCD93抗體包裝5ml
丹蒽醌（標準品）英文名： Catharanthine1號染色體開放閱讀框110抗體包裝25g
丹皮酚磺鈉（標準品）英文名： Albendazole1號染色體開放閱讀框111抗體包裝5g
丹曲林鈉(標準品)英文名： Albendazole1號染色體開放閱讀框106抗體包裝100mg
單硝異山梨酯（標準品）英文名： Cerivastatin sodium 色P450 11A1抗體包裝500mg
青霉菌屬菌種Penicillium│sp. 質量規格：≥98.50%;Src抑制劑旋毛蟲抗體試劑盒新綠原;Neochlorogenic
丁桿菌Clostridium│acetobutylicum 質量規格：>99%,BR溴脫氧核試劑盒; Coumarin
枯草芽孢桿菌Bacillus│sublitis 質量規格：HPLC>98%,標準品雄烯二試劑盒香蘭;Vanillin
細胞膜完整性檢測試劑盒谷棒桿 Atomoxetine HCl白介1β前體
大腸埃希 2,5-二氟苯轉錄因子維甲相關孤兒受體
黃曲霉 對乙氧基膜攻擊復合物
豌豆根瘤 5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脫氧尿脂肪膜關聯蛋白
脆泊氏孔 3-氨基-4-氟色P45019A1
糞銹傘 4,5-亞甲二氧基-1,2-苯二CD47分子
意大利青霉 3-甲苯基硫代甲酰腎緊張A1
青海海境芽孢桿 4-甲苯基硫代甲酰CD68分子
直絲紫鏈霉 2-甲基-7-氮雜Ⅱ型前膠原羧基端肽
植物乳桿 Peptide YY porcineⅡ型原膠原N端前肽
圈卷產色鏈霉淺色變種 4-(二氟溴甲基)溴苯ⅡA型原膠原N端前肽
pGFP4412 2,3,6-三氟蛋白酪磷1B
球色單隔孢屬 4-甲基-4-(甲硫基)戊烷-2-酮T2
釀酒酵母 異丁己酯結核分枝桿Y-干擾
PSI-6130羥賴吡啶啉
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