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貨號 | FS-X9688 |
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中文名稱:細胞存活率檢測試劑盒
英文名稱:
產品規格:100T
貨號:FS-X9688
產品介紹:
細胞存活率檢測試劑盒是通過檢測細胞膜的完整性來檢測細胞的存活率。通常情況下細胞膜喪失即可認為細胞研究死亡,本試劑盒中染料不能使正常健康保持完整細胞膜的細胞染色,而可以使細胞膜不完整的細胞染色,通過顯微鏡下直接計數拍照后計數,就可以對細胞存活率進行精確的定量。 儲存條件:2-8℃避光保存。 有效期:一年。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
髓過氧化物特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCA IgG)英文名:MPO-ANCA IgG ADP核糖基化樣因子ARL3抗體包裝25g
髓過氧化物特異性抗中性粒細胞胞質抗體(MPO-ANCA)英文名:MPO-ANCA 花生四烯15脂氧合1抗體包裝5g
髓過氧化物(MPO)英文名:MPO 癌增強蛋白2抗體包裝1g
性磷(ACP)英文名:ACP α1微球蛋白抗體包裝100g
性成纖維細胞生長因子(aFGF/FGF-1)英文名:aFGF/FGF-1 α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體包裝25g
性β葡萄糖苷(GBA)英文名:GBA 腺苷A2b受體/神經生長因子1受體抗體包裝1mg
絲裂原激活的蛋白激/MAP激(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)英文名:Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1 AMPK的相關蛋白激5抗體包裝1g
絲轉肽抑制劑Kazal type 3(SPINK3)英文名:SPINK3 致瘤磷蛋白32相關蛋白1抗體包裝25g
絲/蘇蛋白磷(STK)英文名:STK 腺苷脫抗體包裝5g
通道蛋白9(AQP-9)英文名:AQP-9 含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體包裝1g
通道蛋白5(AQP-5)英文名:AQP-5 ATRNL1蛋白抗體包裝25g
通道蛋白4(AQP-4)英文名:AQP-4 AFP4a蛋白抗體包裝5g
通道蛋白3(AQP-3)英文名:AQP-3 鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體包裝250mg
通道蛋白2(AQP-2)英文名:AQP-2 鐵蛋白Fe65樣蛋白2抗體包裝25g
通道蛋白1(AQP-1)英文名:AQP-1 β淀粉樣蛋白前體蛋白結合蛋白2抗體包裝5g
ANKLE2蛋白抗體糖抗原19-9(CA19-9)Otenabant (CP945598)鹽鹽是CB1受體高親和性拮抗劑,Ki為0.7 nM。
細胞存活率檢測試劑盒鏈格孢 2,6-二氟苯甲酰β2微球蛋白
更新世肉桿 5-苯基-1H-四氮唑β2整合
巨大芽胞桿 5-氟-2-甲氧基苯酸β氨基己糖苷A
杏鮑菇 雙(乙酰酮基)二異基鈦酸酯β半乳糖苷
鮮綠青霉 4-丁基β淀粉
芽孢桿 2,4,5,6-四嘧啶β淀粉樣蛋白1-40
血紅紅曲 正基酸β淀粉樣蛋白1-42
乳桿屬 基化亞砜β-防御
蘇云金芽孢桿肯尼亞亞種 8-溴辛酸β-防御1
水稻漢納酵母 3-溴-5-氟β-防御2
球形賴氨酸芽孢桿 4,4'-二氨基二環己烷β-防御3
Aureimonas pseudogalii 5-溴β干擾
大腸埃希氏 2-苯氧基乙β痕跡蛋白
香菇 1-甲基-2-苯基-3-甲β-聯蛋白
果生假絲酵母 2-溴-3-三氟β-內啡肽
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