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革蘭氏菌染色鑒定試劑盒(Brown-Hopp)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 16:28:59瀏覽次數:167次

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貨號 FS-X9877
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中文名稱:革蘭氏菌染色鑒定試劑盒(Brown-Hopp)

英文名稱:Brown-Hopp Staining Kit

產品規格:100次

貨號:FS-X9877

產品介紹:

產品特點:

1. 操作簡單、染色穩定。

2. 適用范圍廣,可以用于各種石蠟組織切片的染色。

3. 本試劑盒至少可以染色100張切片。

4. 本產品適用于用10%緩沖中性甲酸、2.5%-磷酸緩沖液、-Zenker固定液等固定的組織,但不適用于Bouin固定的組織。

保存條件:常溫,有效期半年。

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

鏈霉菌雙鏈RNA腺脫基抗體(N端)Human LIN7C 豬肌激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒

磚紅鐮刀菌腺單磷活化蛋白激α2抗體Human LILRA4 豬肌激(CK)免疫試劑盒

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黑紫紅菇α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1Human LGI2 豬肌U型激,線粒體(CKMT1)免疫試劑盒

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糞產堿菌糞亞種磷化活化轉錄因子1抗體Human LGP2 豬環磷鳥(cGMP)免疫試劑盒

小孢根霉華變種磷化活化復制因子2抗體Human LGI3 豬化學趨化因子(KC)免疫試劑盒

根瘤菌磷化活化復制因子2抗體Human LGR5 豬紅生成(EPO)免疫試劑盒

嗜熱脂肪地芽孢桿菌磷化活化復制因子2抗體Human LDLRAD1 豬黑皮質受體-2(MC2R)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化活化復制因子2抗體Human LDOC1 豬核因子-κB(NF-κB)免疫試劑盒

矩圓黑盤孢磷化活化復制因子2抗體Human LEF1 豬核受體亞家族1,H組,成員4(NR1H4)免疫試劑盒

鮭色鎖擲酵母磷化活化復制因子2抗體Human LGR6 豬含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪激2(Tie-2)免疫試劑盒

桃色擬青霉Paecilomyces│persicinus 質量規格:>98%,BR補體蛋白3試劑盒醉椒

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規格:>98%,BR補體C1q腫瘤壞死因子相關蛋白1試劑盒異連翹酯A

百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質量規格:>98%(HPLC),USP補體7試劑盒氧海堿
革蘭氏菌染色鑒定試劑盒(Brown-Hopp)大腸埃希 3-磺酰基-4-氟沙眼衣原體IgM

玉黑粉 4-苯磺酰脲肝

香菇Cr04 β-內啡肽,鼠前腦源性神經營養因子

大腸埃希氏桿 2,5-二氟苯皰疹病-8型感染IgG抗體

尖孢鐮孢 甲基烯十二氟庚酯皰疹病-8型感染IgM抗體

彩色豆馬勃 2-(甲硫基)乙酰單純皰疹病1IgG抗體

熒光假單胞 Cys-Gly, oxidized單純皰疹病1IgM抗體

尖孢鐮刀 1-(4-氟苯基)哌EB病IgG抗體

扁柄側耳 2--4-氟巨病IgM抗體

紅曲紅曲 2--5-氟單純皰疹病2IgG抗體

褐囊蜜環 4-氨基-3-氟吡啶人類嗜T病抗體

釀酒酵母 Nefiracetam型肝炎病抗體

枯草芽孢桿 4-羥基吡啶-2-羧核糖核H

黑曲霉 2-羥基甲酯EB病抗體

釀酒酵母 2-苯氧基血吸蟲抗體

 


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