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貨號	FS-01S63256

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產品名稱：SP蔗糖磷酸化酶檢測試劑盒微量法

規(guī)格：100管/96樣

檢測方法：微量法

貨號：FS-01S63256
商品介紹：

測定意義

SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中，裂解葡萄糖苷鍵，催化葡萄糖基轉移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等，合成相應的葡萄糖基低聚糖。此外，SP還能催化氫合成熊果苷，具有強的美白效果，在化妝品工業(yè)中具有重要應用。

測定原理：

SP能夠以磷酸為受體，催化蔗糖產生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH，導致340nm光吸收值增加。測定340nm吸光度增加速率，即可計算SP活性。

自備實驗用品及儀器：

天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取：

1、細胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細胞：先收集細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細胞數量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

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SP蔗糖磷酸化酶檢測試劑盒微量法柱層層析硅膠 60目以上 280um三 AR,99.0%FGF-9 human 人成纖維生長因子-9

柱層層析硅膠 40-80目 180-450um三（TFA）色標GCS ,≥99.5% (GC)GLP-1(human) 人胰高血糖樣肽1

柱層層析硅膠 60-80目 180-250um三測序TGF Beta 2 人轉化生長因子 β 2

柱層層析硅膠 60-100目 150-280um三 for HPLC, ≥99.5% (GC)TGF Beta 1 人轉化生長因子 β 1

柱層層析硅膠 80-100目 150-180um三 >99.5%ER(Estrpgen Receptor)Human 人雌受體

柱層層析硅膠 80-120目 120-180um三光譜級PR(Progestogerone receptor)Human 人孕受體

柱層層析硅膠 100-120目 125-150um三 for LC-MS, ≥99.5%EGF 人表皮生長因子

柱層層析硅膠 100-160目 97-150umA甙甜菊糖 96%EGFR 人表皮生長因子受體