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當前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞組織染色>> 伊紅染色液
| 貨號 | FS-X9779 |
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中文名稱：伊紅染色液
英文名稱：Eosin Staining Solution
產品規(guī)格：100ml
貨號：FS-X9779
產品介紹:
本染色液操作簡單，不使用汞、甲醇等有毒試劑，可以用于組織切片或培養(yǎng)細胞的染色。本伊紅染色液染色后細胞漿呈粉紅色或紅色。本染色液可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本伊紅染色液染色后進行免疫熒光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫組化染色后再進行伊紅復染。本染色液可以重復使用，直至認為效果不佳時再換用新的染色液。一個包裝的本染色液至少可以染色200個樣品。 注意事項： 1. 需自備4%多聚、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，中性樹膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片，需自備90%乙醇，無水乙醇以及二甲苯。 2. 染色液可以重復使用多次，認為效果不佳時再更換新的染色液。 3. 第一次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預實驗。 儲存條件：室溫，有效期一年。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
ⅩⅢ(F13)英文名：F13 囊性纖維化跨膜轉運調節(jié)因子抗體包裝250mg
Ⅹ(F10)英文名：F10 酪蛋白激2相互作用蛋白1抗體包裝1g
子Ⅸ(F9)英文名：F9 CD40L抗體包裝25g
Ⅷ(F8)英文名：F8 α-s1酪蛋白抗體包裝5g
Ⅶ(F7)英文名：F7 CIDEB抗體包裝5ml
Ⅴ(F5)英文名：F5 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體包裝25g
Ⅱ(F2)英文名：F2 信號轉導蛋白亞基7A抗體包裝5g
凝血/抗凝血復合體(TAT)英文名：TAT 凋亡抑制因子抗體包裝1g
凝溶膠蛋白(GS)英文名：GS D型產氣莢膜梭菌抗體包裝5g
凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)英文名：LOX1 降鈣抗體包裝1g
鎳紋蛋白(METRN)英文名：METRN 20號染色體開放閱讀框14抗體包裝250mg
尿調蛋白(UMOD)英文名：UMOD 結締組織生長因子抗體包裝25g
尿皮質3(UCN3)英文名：UCN3 性T抗原-4抗體包裝1g
尿皮質2(UCN2)英文名：UCN2 降鈣受體抗體包裝5g
尿皮質1(UCN1)英文名：UCN1 1號染色體開放閱讀框38抗體包裝100mg
副球菌Paracoccus│sp. 質量規(guī)格：純度>97%腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ試劑盒植;Phytic acid
泊庫島食烷菌Alcanivorax│borkumensis 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品腫瘤壞死因子超家族15試劑盒q;fraxinellone
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規(guī)格：UV≥98%，標準品腫瘤壞死因子γ試劑盒芝麻酚;Sesamol
伊紅染色液枯草芽孢桿 4,4'-雙(4-氨基苯氧基)二苯砜胰島樣生長因子結合蛋白-3
黑曲霉3.3928 氧化鈷(III)胰島樣生長因子結合蛋白4
米根霉 3-苯乙胰島樣生長因子結合蛋白-6
馬杜拉放線 2-甲氧基苯氧基乙乙酯胰島樣生長因子結合蛋白-7
總狀共頭霉 苯甲氧羰基-DL-色胰島樣因子5
釀酒酵母 烯草酮胰島原
多根硬皮馬勃 溴甲氧胰淀
釀酒酵母 (R)-N-芴甲氧羰基-3-氨基-3-苯基-1-胰高血糖
大葉胡枝子腐朽病 2-溴苯并噻唑-6-羧乙酯胰高血糖樣肽1
銅綠假單胞(綠膿桿) 3-氧代環(huán)丁基芐酯胰高血糖樣肽1.7-36
大豆慢生根瘤 4-氨甲基四氫吡喃胰高血糖樣肽2
豬瘟病間接抗體 5-溴-1,3-二氟-2-芐氧基苯胰羧肽B2
多粘類芽胞桿 2--3-溴-5-胰腺癌標志物-CA242
嗜芽孢桿 5-氨基-2-溴-3-吡啶胰腺衍生因子
白色茶樹菇 2-羥基異丁酰胰脂肪
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