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棉藍乳酚油染色液

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 14:40:32瀏覽次數:156次

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貨號 FS-X9770
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產品介紹:

霉菌是形成分枝菌絲的真菌的統稱,意即“發霉的真菌",它們往往能形成分枝繁茂的菌絲體,但又不象蘑菇那樣產生大型的子實體。霉菌菌絲較粗大、孢子容易在空氣中飄散,所以制標本時常用棉藍乳酚油染色液

棉藍乳酚油染色液特點:細胞不變形,具有殺菌,且不易干燥,能保持較長時間,是霉菌菌絲、孢子的形態常分類的重要依據。

儲存條件:常溫運輸,避光保存,有效期一年。

使用方法:

1.涂片:載玻片編號,于載玻片中央滴加2~3滴棉藍乳酚油染色液

2.用滅菌接種環或牙簽等器具取一小塊有顆粒或顏色部分真菌菌落。

3.放入載玻片上的棉藍乳酚油染色液中,混勻。

4.加蓋潔凈的蓋玻片,輕輕按壓制成壓片。

5.光學顯微鏡在低倍、高倍或油鏡下觀察真菌形態。

6.染色結果:真菌(尤其是煙曲霉菌)中孢子與菌絲是呈藍色的,背景為淡藍色。待檢細菌培養時間會影響染色,菌落培養時間過長或已死亡或細菌溶解,染色結果都常呈陰性反應。

中文名稱:棉藍乳酚油染色液

英文名稱:Lactic Acid Phenol Cotton Blue Staining Solution

產品規格:250mL

貨號:FS-X9770

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

衰老關鍵蛋白2(FBLN2)英文名:FBLN2 神經蠟樣質脂褐質沉積病蛋白CLN6抗體包裝25g

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柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei 質量規格:HPLC>98%,標準品轉錄因子抗體-1試劑盒cis-紫莖女貞B ;cis- Lig

黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格:>99%,超純,培養級轉錄因子SOX-5試劑盒紫莖女貞D ;Ligupurpuros

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:HPLC>98%,標準品轉錄因子SOX-4試劑盒紫莖女貞C;Ligupurpurosi
棉藍乳酚油染色液聚生殼 2,5-二-3-溴吡啶心肌特異性肌鈣蛋白T

迪吉氏黃桿 3,5-二氟-4-苯心肌營養1

中國臺灣芽孢桿 噻吩-3-乙心鈉

病研所芽孢桿 化銪(II)心型脂肪結合蛋白3

耐冷類諾卡氏 2-正丁基乙酰乙乙酯心型脂肪結合蛋白

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球孢白僵 高錳六水合物鋅指蛋白36

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橄欖產色鏈霉 2,3-二溴-5-吡啶新飽食分子蛋白1

簡青霉 2-氟-4-苯新喋呤

Streptococcus sanguinis 3--4-氟新蝶呤

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山東糖多孢 鄰三氟甲氧基苯乙信號傳導子及轉錄激活子3

水稻腸桿 碳鎂(菱鎂礦)信號傳導子及轉錄激活子6

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