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蘇丹Ⅳ染色液-A液

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 15:43:49瀏覽次數:170次

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貨號 FS-X10081
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中文名稱:蘇丹Ⅳ染色液-A液

英文名稱:

產品規格:100ml

貨號:FS-X10081

產品介紹:

用途:

脂肪染色,主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質的異常沉著。

注意事項:

主要由蘇丹四號、乙醇等組成。

儲存條件:室溫,避光,12個月

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

Litorilituus sediminis胞漿動力蛋白中間鏈2抗體Human IRF3(Interferon regulatory factor 3) 人蛋-R-亞砜還原 B2,線粒體(MSRB2/CBS-1/MSRB/CGI-131)免疫試劑盒

土芽胞桿菌抑癌蛋白DKK3抗體Human GUCY2C(Heat-stable enterotoxin receptor) 人彈性蛋白2,中性粒(ELA2)免疫試劑盒

曲霉單克抗體Human BPIFA2(BPI fold-containing family A member 2) 人彈性蛋白(Elastase)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌腫瘤壞死因子配體超家族成員10CHuman MST1P9(Putative macrophage-stimulating protein MSTP9) 人彈性蛋白(ELN)免疫試劑盒

多粘類芽孢桿菌干擾誘導蛋白p58ipk抗體Human UTS2D(Urotensin-2B) 人膽(Cholic acid)免疫試劑盒

圍小叢殼轉錄調節因子DACH2抗體Human HIST1H4A(Histone H4) 人膽囊收縮/縮膽囊八肽(CCK-8)免疫試劑盒

牡丹枝孢(牡丹葉霉病菌)穿膜蛋白DLK1抗體Human S100A7(Protein S100-A7) 人膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒

紅酵母屬Dysferlin蛋白抗體Human CELA1(Chymotrypsin-like elastase family member 1) 人轉運體樣蛋白4(SLC44A4)免疫試劑盒

加拿大色鹽桿菌防御β2/Defensin β2抗體Human CALR(Calreticulin) 人乙酰轉移(ChAT)免疫試劑盒

小鏈霉菌死亡相關蛋白5抗體Human TRUB1(Probable tRNA pseudouridine synthase 1) 人膽紅氧化代謝物 免疫試劑盒

赭色擲孢酵母解旋DEAD5抗體Human PTEN(Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 3-phosphatase and dual-specificity protein phosphatase PTEN) 人膽固酯轉移蛋白(CETP)免疫試劑盒

大腸桿菌屬間粘附分子非整合蛋白3抗體Human SULT1A1(Sulfotransferase 1A1) 人膽固7α-羥化(CYP7A)免疫試劑盒

釀酒酵母Caspase 激活的脫氧核糖核抗體Human NDP(Norrin) 人膽固(CH)免疫試劑盒

木糖氧化無色桿菌死亡效應結構域蛋白1抗體Human QDPR(Dihydropteridine reductase) 人單絲蛋白激1(LIMK1)免疫試劑盒

栗疫菌死亡效應結構域蛋白2抗體Human HMGA1(High mobility group protein HMG-I/HMG-Y) 人單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒

*瓜果腐霉菌DNA聚合β抗體Human MMP19(Matrix metalloproteinase-19) 人單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫試劑盒

惡臭假單胞菌Pseudomonas│putida 質量規格:分析標準品,≥99.5% (GC)苔黑龍膽二糖

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:分析標準品,≥99.0%(GC)反式茴香腦

大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:分析標準品法卡林二
蘇丹Ⅳ染色液-A液稻梨孢 香蘭基丁羽狀斑駁病

赤霉 Raloxifene HCl輕型黃邊病

核黃德沃斯氏 鹽喹那普利烯酰-CoA水合

豇豆慢生根瘤 Fmoc-L-4-苯淀粉

蘇云金芽孢桿 2-氨基-6-溴NAD-蘋果

土壤伯克氏 1-O-癸基-β-D-麥芽糖NADP-蘋果

黑曲霉 3--5-甲氧基碳酐β

亮白曲霉 3-甲基氨基轉移

黃曲霉 4-(2-三氟氧基)天門冬氨基轉移

黃色毛霉 (R,R)-(+)-雙(α-甲芐基)鹽鹽L(+)-3-羥脂酰脫氫

小紅酵母 基環三氧烷NADP-依賴蘋果脫氫

香栓 2--5-(三氟甲基)苯甲脫鎂葉綠A

少根根霉原變種 糖精鈉 水合物7-羥基

芽孢桿 7,7-二二環[4.1.0]庚烷

枯草芽孢桿 3-溴4-苯蘋果脫氫

 


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