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貨號	FS-X9970

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：Weigert彈力纖維染色液

英文名稱：

產品規格：3×50ml

貨號：FS-X9970

產品介紹:

用途：

彈力纖維染色

注意事項：

又Weigert樹脂酚復紅染色液，主要顯示成熟的彈力纖維。主要由堿性品紅、VG等組成。

儲存條件：4℃，避光，12個月

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

根瘤菌19號染色體開放閱讀框42抗體Human ATG4B 人組織蛋白C(CTSC)免疫試劑盒

膠凍樣芽胞桿菌19號染色體開放閱讀框44抗體Human ATG7(Autophagy-related protein 7) 人組織蛋白B(CTSB)免疫試劑盒

釀酒酵母19號染色體開放閱讀框48抗體Human BBS8 人組蛋白乙酰化(HAT)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌19號染色體開放閱讀框50抗體Human ATPB(ATP synthase subunit beta) 人組蛋白脫乙酰化2(HDAC2)免疫試劑盒

長枝木霉19號染色體開放閱讀框51抗體Human ATIC 人組蛋白去乙酰化3(HDAC3)免疫試劑盒

硬水黃桿菌19號染色體開放閱讀框52抗體Human ARP2 人組蛋白去乙酰化(HDAC)免疫試劑盒

Bacillus anthracis19號染色體開放閱讀框55抗體Human ATR 人組蛋白賴N-甲基轉移SETD7(SETD7)免疫試劑盒

巨獸芽孢桿菌19號染色體開放閱讀框56抗體Human ATG4B 人組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)免疫試劑盒

四川散斑殼19號染色體開放閱讀框57抗體Human BBS8 人組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒

玉蕈離褶傘19號染色體開放閱讀框61抗體Human ATG7(Autophagy-related protein 7) 人組(HIS)免疫試劑盒

黑曲霉19號染色體開放閱讀框77抗體Human ATIC 人足標記蛋白/足盂蛋白(PCX)免疫試劑盒

產棒桿菌核DNA結合蛋白C1D抗體Human ATPB(ATP synthase subunit beta) 人總蛋白S(TPS)免疫試劑盒

奧氏蜜環菌1號染色體開放閱讀框58抗體Human ARP2 人總蛋白C(TPC)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌21號染色體開放閱讀框66抗體Human AXL(Tyrosine-protein kinase receptor UFO) 人自然抗性相關巨噬蛋白2(NRAMP-2)免疫試劑盒

嗜低鹽適鹽菌CDC42效應蛋白3抗體Human ATR 人自然抗性相關巨噬蛋白1(NRAMP-1)免疫試劑盒

異常漢遜酵母異常變種7號染色體開放閱讀框43抗體Human ARP3 人轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒

魯酵母Saccharomyces│rouxii 質量規格：>98%，BRN-乙酰-β-D-基葡萄糖試劑盒柯諾辛

: Le-114,廣東微生物所46資源名稱: 香菇質量規格：BRN-基-D-天冬受體試劑盒奎寧

樹狀假絲酵母Candida│arborea 質量規格：BRN鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白試劑盒苦馬豆
Weigert彈力纖維染色液Chromohalobacter 顏料黃1KL-7

宓花豆根瘤 2--5-溴甲酯抗M3D受體抗體

塔賓曲霉 4-甲基-5-甲基-1,3-惡唑熱休克蛋白27

傘枝犁頭霉鹽安他唑啉酪激

柱形矛束霉 7-羥基-5-甲基-1,3,4-三氮利磷化HER2蛋白

水生拉恩氏 2-溴-5--1,3-二氟苯膜聯蛋白ⅡIgG抗體

糞產堿桿 3--5-氟膜聯蛋白ⅡIgM抗體

科氏芽孢桿（可訂購）對苯乙酰Mac-2結合蛋白糖基化異構體

樟疫霉蘆丁三水合物白喉抗體

鏈格孢烯己酯載脂運載蛋白-2

冬蟲夏草（冬蟲夏草，蝙蝠蛾被毛孢，中國被毛孢） 4-氨基苯甲脒過氧化物1

三葉草根瘤 5-溴-2-氟腺病7型IgG抗體

棘孢小單孢 (E)-乙-2-己烯酯腺病7型IgM抗體

楊生盤二孢 3-溴-4-T白血病1+2型病

地衣芽孢桿 3-溴-4-甲酯ATP合成
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)