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貨號	FS-X10181

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：硫堇-橘紅G植物組織染色液

英文名稱：

產品規格：2×50ml

貨號：FS-X10181

產品介紹:

用途：

主要由硫堇染色液、橘紅G染色液組成，木質化組織被染成藍色，纖維細胞被染成黃綠色，細菌被染成藍色，可以用于Synchytrium、Peronospora、Phytophthora、Sclerotinia、Botrytis、Puccinia、Fusarium、Diplodia等真菌的染色

注意事項：

因材料種類、切片厚薄的不同，染色時間也不同。同時要注意酒精脫色的程度。

儲存條件：室溫，避光，12個月

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

球孢白僵菌脊髓性肌癥蛋白Gemin4抗體Human PSMB9(Proteasome subunit beta type-9) 大鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)免疫試劑盒

擬莖點霉脊髓性肌癥蛋白Gemin5抗體Human UQCRB 大鼠粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)免疫試劑盒

葡萄座腔菌脊髓性肌癥蛋白Gemin7抗體Human UQCRC2 大鼠粘蛋白/粘液1(MUC1)免疫試劑盒

硬水黃桿菌GTP結合絲裂原誘導T蛋白抗體Human URAT1 大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)免疫試劑盒

中國臺灣根霉染色體卷曲螺旋域包含蛋白1抗體Human UQCRFS1 大鼠載脂蛋白H(Apo-H)免疫試劑盒

熱帶假絲酵母脊髓性肌癥蛋白Gemin6抗體Human UQCRQ 大鼠載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒

蒼黃擬無枝菌磷化膠質纖維性蛋白抗體Human URB2 大鼠載脂蛋白C-II(APOC2)ELISA

核果黑腐皮殼菌自主生長因子GFI1抗體Human UQCRH 大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)免疫試劑盒

自養假諾卡氏菌G蛋白偶聯受體109A抗體Human URB1 大鼠載脂蛋白B-48(ApoB48)免疫試劑盒

冷海水黃桿菌γ-銜接蛋白相關蛋白1抗體Human UPK1A 大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)免疫試劑盒

野油菜黃單胞菌棲絨毛致病變種γ-銜接蛋白相關蛋白2抗體Human UPF3B 大鼠載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒

紅酵母γ-銜接蛋白相關蛋白3抗體Human UPK2 大鼠載脂蛋白A1前體(Pre-Apo-A1)免疫試劑盒

釀酒酵母配子生成抗體Human URM1 大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)免疫試劑盒

半膠蘑菇(暫定名)γ谷酰轉肽2重鏈抗體Human UNC13D/Munc13-4 大鼠孕受體(PROGR)免疫試劑盒

拜耳接合酵母γ-谷酰轉肽5重鏈抗體Human UPK3B 大鼠孕激/孕(PROG)免疫試劑盒

Promicromonospora磷化GATA結合蛋白3抗體Human CXCR5(C-X-C chemokine receptor type 5) 大鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)抗體(IgG)免疫試劑盒

尖孢鐮孢Fusarium│oxysporum 質量規格：分析標準品28-去基-β-香樹脂

金針菇Flammulina│velutipes 質量規格：Bentone SD-1,適于中至低性溶劑巖大戟內酯B

棒束孢Isaria│sp. 質量規格：Bentone SD-2,適于中高性溶劑野馬追內酯B
硫堇-橘紅G植物組織染色液沙漠畢赤酵母 5-硝基骨特異性堿性磷B

粗柄白蘑 3--4-異氧基苯基骨成型蛋白

扣囊復膜孢酵母 3-芐氧基-1-過氧化氫

巴氏醋桿 7-甲氧基苯并呋喃-2-甲過氧化物體增殖物激活受體α

微球三蝶烯過氧化物體增殖物激活受體β

美澳型核果褐腐病 4-羥基-5-嘧啶甲甲酯過氧化物體增殖物激活受體γ

考克氏 4-氨基-3,5-二溴吡啶過氧化脂質;乳過氧化物

啤酒神金黃桿 2,6-二甲氧基吡還原型

卷枝毛霉灰藍變型醌茜隱色體核心蛋白聚糖

微枝形桿還原黃G核因子E2相關因子2

糙梗青霉 2,-1-甲叔丁酯核因子κB

淺白隱球酵母溴化1-丁基-2, 3-二甲基咪唑核因子κB受體活化因子配基

釀酒酵母 1,4-二酞褐黑

白藍放線 2-溴-9,9-二苯基芴黑色抗體

根瘤 N-甲基異黑皮質受體4
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)